[发明专利]一种提高人体免疫力的鲜活小球藻悬浮液的制备方法

权利要求书

1.一种提高人体免疫力的鲜活小球藻悬浮液的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)制备培养基

①培养液原料准备：硝酸铵0.2-0.4g、过磷酸钙溶液0.3-0.5ml、氯化铁溶液0.15ml、硝酸钴溶液0.1ml、硫酸铜溶液0.1ml、碳酸溶液5-10ml、自来水1000ml，其中，所述过磷酸钙、氯化铁、硝酸钴和硫酸铜溶液质量浓度分别为10％、1％、0.1％和0.1％；所述碳酸溶液pH值为3.0-5.0；

②制备培养基：将所述培养液原料加入小球藻培养装置中，充分混合均匀后，在缓慢搅拌下升温至28-32℃，即得培养基；

2)初始培养

将小球藻浮游菌株接入所述培养基中，使培养物的细胞初始浓度达到200万个细胞/L，即得小球藻培养液；接通光源，对所述小球藻培养液进行光照培养，光照培养时间为12-14小时/天，光照培养结束后关闭光源；以后每天进行所述光照培养，并在接通光源时，补加0.5-1.0％的碳酸溶液，如此循环连续培养4天，使培养液中细胞浓度达到800-1000万/ml，倒出培养液，得到初始小球藻悬浮液，其中，所述碳酸溶液pH值为3.0-5.0，加入量为培养物总量的0.5-1.0％；

3)浓缩小球藻悬浮液

①制备浓缩小球藻细胞生物质：向步骤2)所述初始小球藻悬浮液中加入所述小球藻培养液或小球藻浮游菌株后，得到小球藻混合培养液，对所述小球藻混合培养液进行电浮选，使培养液中细胞浓度达到3000万-10亿/ml时，即得浓缩小球藻细胞生物质；

②制备浓缩小球藻培养液：在反渗透装置中，采用反渗透法将步骤2)所述初始小球藻悬浮液浓缩30-50倍，制得浓缩小球藻培养液；

③制备浓缩小球藻悬浮液：将所述浓缩小球藻细胞生物质与浓缩小球藻培养液混合制得浓缩小球藻悬浮液，浓缩小球藻悬浮液中小球藻细胞浓度为初始小球藻悬浮液浓度的60倍。

2.如权利要求1所述的一种提高人体免疫力的鲜活小球藻悬浮液的制备方法，其特征在于：所述小球藻浮游菌株悬浮液中小球藻细胞浓度为800-1000万个/ml。

3.如权利要求1所述的一种提高人体免疫力的鲜活小球藻悬浮液的制备方法，其特征在于：所述步骤2)初始培养中，以后每天进行所述光照培养过程中，在接通光源时，或者通过压缩机和泵提供与空气混合的二氧化碳，通气量为空气总量的1-2％，供气速度为1m³/分钟，得到初始小球藻悬浮液。

4.如权利要求1所述的一种提高人体免疫力的鲜活小球藻悬浮液的制备方法，其特征在于：所述步骤3)-②制备浓缩小球藻培养液时，或者采用超滤法进行浓缩，借助于泵的压力，通过中空纤维超滤膜从里向外过滤培养液，小球藻培养液中粒径为0.01-0.1μm的粒子留在中空纤维超滤膜内部，然后在储液池中冲洗中空纤维超滤膜，并收集浓缩小球藻培养液。

5.如权利要求1所述的一种提高人体免疫力的鲜活小球藻悬浮液的制备方法，其特征在于：向所述浓缩小球藻悬浮液中还通入二氧化碳，制成二氧化碳质量比为0.20-0.30％的碳酸饮料。

6.如权利要求1所述的一种提高人体免疫力的鲜活小球藻悬浮液的制备方法，其特征在于：所述步骤2)初始培养时，小球藻培养液总量为小球藻培养装置容量的80％。