[发明专利]鱼胶原抗氧化肽的制备方法

说明书

本发明公开了鱼胶原抗氧化肽的制备方法：先将原料进行脱脂除杂蛋白处理，溶胀后使用热水浴抽提制备胶原蛋白，然后在胶原蛋白溶液中添加复合酶和酶解助剂进行处理，控制酶解温度、时间及pH，酶解结束后灭酶、离心，所得上清液得到鱼胶原抗氧化肽酶解液，之后使用脱色脱腥剂对鱼胶原抗氧化肽酶解液进行脱色脱腥处理，过超滤膜除杂纯化，低温冷冻，真空干燥即得到鱼胶原抗氧化肽粉。本发明制备方法工艺简单、酶解效率高、便于工业化生产，所制备的鱼胶原抗氧化肽感官品质良好，纯度高，无色无味无杂，分子量小，便于机体吸收利用，且金属螯合能力强。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及鱼胶原抗氧化肽的制备方法。

背景技术

我国地大物博，水域辽阔，水产资源十分丰富，近几年来，随着生活水平的提高，人们对水产资源需求的多样性及实用性逐渐提高，从而促进我国水产加工业的飞速发展。但是，在水产加工业高速发展的同时会产生大量的鱼下脚料，例如鱼皮、鱼鳞、内脏、鱼头等，这些下脚料约占原料鱼的40-50%，这些下脚料的胶原含量相当丰富，将其作为新型的胶原蛋白资源，具有很高的开发和利用价值。

自由基是独立存在的、带有不成对电子的原子或原子团，化学性质极活泼，氧自由基是其中一类，又称活性氧，主要有超氧阴离子、羟自由基、过氧化氢、单线态氧等类型，尤以羟自由基的性质最活泼、毒性最大，可与活细胞内任何分子发生反应而造成损伤，且反应极快。在正常生理状态下，机体内自由基的产生与清除处于动态平衡状态，但当机体处于不良环境以及随着年龄的增长，体内的自由基就会因清除过慢或产生过多而积累，过剩的自由基因其高度的活性与极强的氧化反应能力，可通过氧化作用来攻击所遇到的任何分子，使机体内大分子物质产生过氧化变性，交联或断裂，引起细胞结构和功能的破坏，从而造成机体的多种损伤和病变。

天然抗氧化物质，特别是具有抑制生物大分子过氧化能力和清除体内自由基功能的抗氧化多肽日益受到人们的关注，利用水产品加工过程中的鱼下脚料生产高附加值的胶原抗氧化肽，不仅能够变废为宝，清除体内多余的自由基，保护细胞和组织不被过氧化，减少疾病的发病率，还可解决了陆生哺乳动物胶原蛋白产品涉及的宗教及人畜共患病等问题，因此具有重要的研究价值及实际意义。

现有技术如授权公告号为CN 103409489 B的中国发明专利，公开了一种鱼胶原抗氧化肽的制备方法，该制备方法为以鱼皮或鱼鳞为原料，在预处理过的鱼皮或鱼鳞中加入复合蛋白酶，酶解后，得鱼胶原蛋白酶解液，将获得的鱼胶原蛋白酶解液加热，进行灭酶后过滤，再利用纳滤膜去除氨基酸和盐分，获得鱼胶原肽溶液，在鱼胶原肽溶液中加入疏水性吸附剂，静置吸附，过滤后在疏水性吸附剂中加入有机溶剂，过滤后得鱼胶原抗氧化肽溶液，利用真空加热蒸发去除鱼胶原抗氧化肽溶液中的有机溶剂，得到具有抗氧化功能的鱼胶原抗氧化肽。但是，该制备方法制备过程复杂，酶解效率较低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺简单、酶解效率高、便于工业化生产的鱼胶原抗氧化肽的制备方法，所制备的鱼胶原抗氧化肽感官品质良好，纯度高，无色无味无杂，分子量小，便于机体吸收利用，且金属螯合能力强。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

鱼胶原抗氧化肽的制备方法，包括原料预处理、胶原蛋白的制备、胶原蛋白酶解、酶解液脱色脱腥、酶解液的纯化，具体步骤如下：

原料预处理：以鱼皮或鱼鳞为原料，置于冰水中清洗、剪碎，然后将其置于含有脱脂剂的溶液中，在转速为180-200rpm下连续搅拌，控制料液比为1:20-25，脱脂时间36-40h，脱脂温度8-12℃，之后将脱脂后的鱼皮用0.05-0.1mol/L的NaOH溶液浸泡30-50min，最后用水将浸泡过的原料反复清洗至中性，沥干水分待用，对原料进行预处理可以将包裹在胶原蛋白纤维周围的脂肪以及诸如球蛋白、角蛋白等非胶原性蛋白质去除，便于后续的提取分离工作，有利于提高鱼胶原抗氧化肽的纯度；