[发明专利]墨旱莲的检测试剂盒和检测方法

说明书

本发明公开了一种墨旱莲特异性SCAR分子标记，还公开了扩增该分子标记序列的引物对及其用途，还公开了墨旱莲的检测试剂盒和检测方法。本发明检测试剂盒和检测方法可以准确、有效的鉴别墨旱莲，特异性强，耗时短，应用前景良好。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种墨旱莲的检测试剂盒和检测方法。

背景技术

墨旱莲为菊科植物鳢肠(Eclipta prostrate)的全草，每年夏、秋两季割取全草，除去泥沙，晒干或阴干即可入药。由于搓揉它的茎叶时，可见黑色的汁液流出而得名。全草药用，主要含有三萜类，香豆草醚类，黄酮类，甾体类，噻吩类和挥发油等物质，具有很强的免疫调节、保肝、抗纤维化、抗肿瘤、抗自由基抗氧化和酶激活等药理作用，临床上常用于治疗吐血、衄血、尿血、便血、血痢、刀伤出血、须发早白、白喉、淋浊、带下、阴部湿痒等症。

但墨旱莲和赶黄草形态相似，容易混淆，从而影响用药的准确性。因此，有效鉴别墨旱莲，是非常必要的。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种方便、快速、准确地检测墨旱莲的试剂盒和方法。

本发明提供了一种墨旱莲特异性SCAR分子标记，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了扩增SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的引物对。

其中，它是SEQ ID NO.2～3所示的引物对。

本发明还提供了上述SCAR分子标记、上述引物对在检测墨旱莲中的用途。

本发明还提供了一种墨旱莲的检测试剂盒，包括检测SEQ ID NO.1所述核苷酸序列的试剂。

其中，所述试剂包括扩增SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的试剂。

其中，所述扩增的试剂包括SEQ ID NO.2～3所示的引物对。

其中，所述墨旱莲为产自四川、江西、安徽的墨旱莲。

本发明还提供了一种墨旱莲的检测方法，包括如下步骤：

a、DNA提取：提取待检样本中的DNA；

b、检测：用上述试剂盒检测待检样本，即可。

本发明通过检测墨旱莲特异性SCAR分子标记，可以有效鉴定待检样本是否为墨旱莲，将墨旱莲与赶黄草及其它植物种类进行准确区分，为墨旱莲药材的合理使用提供指导，本发明方法操作简便，具有良好的应用前景。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1.墨旱莲的改良RAPD扩增。箭头为N7-11的RPAD片段，用于胶回收和克隆。通道1-9是分别是来自江西、安徽、陕西、湖南、四川泸州、四川西昌、贵州、湖北和山西的赶黄草，10为来自泸州的墨旱莲。

图2阳性克隆的菌落PCR鉴定。黑色所指通道的阳性克隆用于Sanger测序。通道“M”显示有分子重量(bp)的DL2000DNA标记。泳道1-2分别代表不同阳性克隆的菌落。

图3不同墨旱莲品种的鉴定。通道1、2和3是来自四川、江西和安徽的墨旱莲；4，5，6是来自四川，江西和安徽的赶黄草。