[发明专利]一种用于检测肿瘤的荧光探针及用途

说明书

本发明公开了一种用于检测肿瘤的荧光探针及用途，一种用于检测肿瘤的荧光探针，其结构如式(I)所示：本发明的探针能够直接用在细胞体系中分析和检测肿瘤细胞ENT蛋白的表达程度，从而完成对肿瘤细胞的筛选，肿瘤细胞对化疗药物的耐药预测，以及筛选不同种类抗肿瘤药物的目的。为肿瘤早期筛选和诊断，发现和开发新的抗肿瘤药物，预测和评估肿瘤对化疗药物的耐药性等提供了有效的手段和有用的工具。

技术领域

本发明属于生物分析检测领域，特别涉及一种靶向核苷转运蛋白通道的荧光探针及其在制备检测肿瘤试剂中的用途。

技术背景

分布于细胞膜上的核苷转运蛋白是负责核苷类药物转运和传递的主要通道。其分为两类，即平衡型核苷转运体(equilibrative nucleoside transporter,ENT)和浓度型核苷转运体(concentrative nucleoside transporter,CNT)。其中，ENT在转运和传递核苷类药物过程中起到十分重要的作用。ENT在肿瘤研究中的重要性主要体现在它在多种人类恶性肿瘤细胞均有广泛的表达。例如，研究表明，hENT1在人宫颈癌(Hela)，人乳腺癌(MCF-7)，人肺癌(A549)，人黑色素瘤(G361)，人白血病(K562)等均有中等及高水平的表达(Neuropharmacology 36(1997)1167-1179).目前，人类的ENT(hENT)被证实由四种亚型(hENT1、2、3、4)，其中对hENT1和hENT2完成了较多的科学研究。结果发现，hENT1能够有效转运核苷类抗肿瘤药物，例如：克拉屈滨(Cladribine)、阿糖胞苷(Ara-C)、氟尿嘧啶(5-FU)，氟达拉滨(Fludarabine)、卡培他滨(Capecitabine)、吉西他滨(Gemcitabine)等等。进一步研究发现，某些核苷类抗肿瘤药物在对肿瘤细胞发挥药效的同时，会同时上调hENT的表达和转运活性，相反，如果肿瘤细胞对某些抗癌药物产生耐药，则hENT会表现为下调(BiochemJ 136(2004)733-740)。此外，蛋白激酶对细胞膜表面的ENT1具有灵敏的调控作用，例如蛋白激酶C(PKC)的某些亚型可增强hENT1的活性和功能(FEBS Letters 517(2002)201-205)。而且，蛋白激酶抑制剂类药物对PKC的抑制作用也直接影响hENT1的表达和转运活性(Pharmacol Exp Ther304(2003)753-760)。

综上所述，如果能够实现对核苷转运蛋白hENT1的针对性荧光识别，通过测试和掌握肿瘤细胞的hENT表达水平，不仅可用于发现对肿瘤有效的核苷类或者蛋白激酶类抗癌药物，还能够通过检测肿瘤患者癌细胞的hENT1表达水平对化疗药物的耐药性进行监控和评价。18F-脱氧胸腺嘧啶核苷(18F-FLT)是目前基于hENT核苷转运蛋白而开发并广泛用于前临床和部分临床研究的肿瘤示踪和显像试剂。18F-FLT的肿瘤检测原理基于放射性F18原子和PET成像技术，由于其在临床研究中被试者出现显著的贫血、粒细胞降低和外周神经病变以及肝肾毒性等，并造成受试者意外死亡(J Infect Dis 170(1994)1394-1403；MolImaging Biol 11(2009)343-355)。结合上述临床应用中出现的问题，该肿瘤示踪剂需要放射性同位素在分子中的植入以及合成效率低等因素极大地限制了它的应用。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种用于检测肿瘤的荧光探针。

本发明的第二个目的是提供一种与ENT蛋白特异性结合或细胞内转运的用于检测肿瘤的荧光探针在检测肿瘤中的用途。

本发明的技术方案概述如下：

一种用于检测肿瘤的荧光探针，其结构如式(I)所示：

其中，

Z选自氢原子，乙酰基，C1-C8的直链烷基，F，Cl，Br，I，NH2，CN，NO2；