[发明专利]用于检测白色念珠菌的试剂盒及方法

说明书

本发明公开一种用于检测白色念珠菌的试剂盒和方法，其中，用于检测白色念珠菌的试剂盒包括液体培养基和微滴生成油，所述液体培养基包含胰蛋白胨4g/L～6g/L、肉胃蛋白酶消化物4g/L～8g/L、葡萄糖15g/L～30g/L和抗生素0.2g/L～0.5g/L。用于检测白色念珠菌的方法，包括以下步骤：将待检测样本接种至所述液体培养基中，然后采用微滴生成油将接种有所述待检测样本的所述液体培养基制成微滴；将所述微滴培养18～72小时，再进行显微观察。该方法成本较低，可以较快速和准确的检测出待检测样本中的白色念珠菌。

技术领域

本发明涉及微生物检测技术领域，具体涉及一种用于检测白色念珠菌的试剂盒和方法。

背景技术

白色念珠菌(CanidiaAlbicans，CA)又称白假丝酵母菌，是人体正常菌群，主要寄生在人体的体表及口腔、消化道、呼吸道和女性生殖道等部位，通常不会引起疾病，但在免疫系统受到损害或抑制的情况下，可引起严重的白色念珠菌病，甚至危及生命。据我国医院感染监测网分析，医院真菌感染发生率从20世纪90年代初的13.9％上升至90年代末的24.4％，而白色念珠菌的感染占真菌感染的约60％，病死率约占20％～63％，白色念珠菌已成为临床感染的常见致病菌。因此提供一种能够提高白色念珠菌有无的检测精确度的检测方法成为亟待解决的问题。

虽然最新的聚合酶链式反应(PCR)检测技术具有较好的准确性，但是由于PCR检测需要对仪器和设备有较高的要求，因此成本过高，不利于普及。目前临床上对白色念珠菌的检测依然以传统方法为主，即采取分离培养、镜检观察、生化鉴定等多个步骤，检测周期长，通常需要4～7天，时间过长。

发明内容

基于此，有必要提供一种成本低、检测速度快且能够提高白色念珠菌有无的检测精确度的用于检测白色念珠菌的试剂盒和方法。

一种用于检测白色念珠菌的试剂盒，包括液体培养基及微滴生成油，所述液体培养基包含胰蛋白胨4g/L～6g/L、肉胃蛋白酶消化物4g/L～8g/L、葡萄糖15g/L～30g/L及抗生素0.2g/L～0.5g/L。

在其中一个实施例中，所述液体培养基中胰蛋白胨的含量为5g/L、肉胃蛋白酶消化物的含量为5g/L、葡萄糖的含量为20g/L。

在其中一个实施例中，所述抗生素选自青霉素、链霉素和氯霉素中的至少一种。

在其中一个实施例中，所述抗生素为青霉素、链霉素和氯霉素的组合，所述青霉素的含量为0.08g/L～0.12g/L，链霉素的含量为0.08g/L～0.12g/L，所述氯霉素的含量为0.15g/L～0.25g/L。

在其中一个实施例中，所述液体培养基的pH值为5～6。

上述试剂盒非常适合白色念珠菌的微滴培养、可以缩短培养时间，从而可以加速白色念珠菌的检测进程。

本发明的另一目的在于提供一种将上述试剂盒用于检测白色念珠菌的方法，包括以下步骤：

将待检测样本接种至所述液体培养基中，然后采用所述微滴生成油将接种有所述待检测样本的所述液体培养基制成微滴；

将所述微滴培养18～72小时，再进行显微观察。

在其中一个实施例中，所述微滴的培养温度为35℃～37℃。

在其中一个实施例中，所述微滴的培养时间为42～72小时。

在其中一个实施例中，在所述显微观察之前还包括将培养之后的微滴进行破乳并稀释的步骤。

在一个实施例中，当所述待检测样本为液体时，在所述将待检测样本接种至液体培养基中的步骤之前还包括所述待检测样本的预处理步骤，具体为将所述待检测样本于1000rpm/min条件下离心3min～5min后取上清液。