[发明专利]一种菌根食用菌菌种的分离培养方法

说明书

本发明涉及一种菌根食用菌菌种的分离与培养方法，其特征为：所述的菌根食用菌菌种的分离培养方法包括如下步骤：a、将菌根菌的孢子或子实体组织放入琼脂培养基中培养菌丝体；b、将以上培养好的菌丝转入琼脂培养基中培养或将琼脂菌丝体接入液体培养基中培养；c、将上述液体培养的菌丝体经匀质器匀质并再次接入液体培养基中培养，直到菌丝体的菌丝球直径达到0.2‑1.5cm为止；d、将以上培养好的菌丝体放在合适的培养条件下培养出菇。本发明的方法经多种菌根食用菌菌种的分离培养实验表明，是一种操作简单有效，效率高的方法，是一个很好的培养基，很适宜于在大量外生菌根菌菌种的分离培养中推广应用，具有显著的经济效益。

技术领域

本发明涉及食用菌领域，特别是一种菌根食用菌菌种的分离培养方法。

背景技术

目前菌根菌的大多数可食用子实体都是著名的食用菌，其价格极其昂贵。如松口蘑(Tricholoma matsutake)、黑孢块菌(Tubermelanosporum Vitt.)、意大利白块菌(Tubermagnatum)、松乳菇(Lactarius deliciosus)、红汁乳菇(L.hatsudake)、美味牛肝菌(Boletus edulis)、橙盖鹅膏菌(Amatanita caesarea)、中华块菌(Tuber sinenseK.Taoet Liu)、印度块菌(Tuber indicum Cooke et Massee)、鸡油菌(Cantharellus cibariusFr.)、干巴菌(Thelephora gan ba jun Zang)、紫红拟锁瑚菌(Clavulinopsismiyabeana(Ito.)Ito.)、褐环乳牛肝菌(Suillusluteus(L.：Fr.)Gray)、厚环乳牛肝菌(Suillusgreviller(KL.)sing.)、变绿红菇(Russulavirescens(schaeff.)Fr.)、橙盖鹅膏(Amanitacaesarea(Scop：Fr.)Pers.ex schw.)、玉蕈离褶伞(Lyophyllumshimeji(kawam.)Hongo)、烟色离褶伞(Lyophyllum fumosum(Pers.：Fr.)Orton)等，还有灰花纹鹅膏(Amanitafuliginea Hongo)、亚稀褶黑菇(Russula subnigricans Hongo)等极具经济价值的毒菌。

但是对其菌种的分离培养一直是一个难题，因其独具的特性，在现有的技术条件下，不能象广泛栽培的腐生食用菌(如香菇、木耳等)那样进行分离培养，培养基在其中扮演了十分重要的角色。目前在外生菌根菌分离和培养的过程中，主要使用的是MMN培养基，此培养基在培养一些林业上常用的比较容易培养的菌根菌时，比较适用，但还是有很多经济价值较高的菌根食用菌在这个培养基上较难以生长，或生长很慢；另外一个培养基就是腐生菌及其它一些微生物培养中经常用到的PDA培养基，但大多数菌根菌在此培养基上难以生长；后来人们又将这两种培养基按一定比例配制，用于菌根菌的培养，使许多菌根菌的分离与培养的成活率和生长速度得到提高，但菌丝较在MMN上要老化快得多。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于菌根食用菌菌种分离和培养的培养基及方法，它可丰富现有外生菌根菌菌种分离培养的培养基和方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案是：一种外生菌根菌菌种分离和培养方法，其特征在于：所述的菌根菌菌种的分离和培养方法包括如下步骤：a、将菌根菌的孢子或子实体组织放入琼脂培养基中培养菌丝体，培养室的温度为15-25℃，根据菌丝的生长速度培养25-35天，直到菌丝体长满培养基表70-80％，放入1-15℃的冰箱中保存备用；b、将以上培养好的菌丝体转入琼脂培养基中继续培养或将菌丝体接入液体培养基中培养，培养条件为150～180r/min，温度为20-28℃，湿度65％，培养7-14天，直到培养基颜色透明，并略带淡黄色时为止；c、将上述液体培养的菌丝体经匀质器匀质并再次接入液体培养基中培养，直到菌丝体的菌丝球直径达到0.2-1.5cm为止；d、将以上培养好的菌丝体放在合适的培养条件下培养出菇，其出菇培养条件为：温度为20-28℃、光照100-600Lux的培养室内静置培养。