[发明专利]一种多肽OA-FF10及其提纯方法与应用有效

专利信息
申请号: 201810366376.2 申请日: 2018-04-23
公开(公告)号: CN108586576B 公开(公告)日: 2019-07-12
发明(设计)人: 孟步亮;杨新旺;王滢;刘乃心;李哲;庞爱兰 申请(专利权)人: 昆明医科大学
主分类号: C07K7/06 分类号: C07K7/06;C07K1/20;C07K1/14;A61K38/08;A61P17/02;A61P17/00
代理公司: 昆明知道专利事务所(特殊普通合伙企业) 53116 代理人: 姜开侠;谢乔良
地址: 650500 云南省昆明*** 国省代码: 云南;53
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摘要:
搜索关键词: 多肽 提纯 愈合 应用 皮肤创伤修复 氨基酸序列 创口 皮肤创伤 体表皮肤 疤痕 修复
【说明书】:

发明公开了一种促皮肤创伤愈合的修复多肽OA‑FF10,所述多肽OA‑FF10包含的氨基酸序列如SEQ No.1所示。本发明还公开了所述多肽OA‑FF10的提纯方法和应用。本发明所述皮肤创伤修复肽OA‑FF10可加速体表皮肤的创口愈合,减少疤痕产生,具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药领域,具体涉及一种多肽OA-FF10及其提纯方法与应用。

背景技术

作为人体最大的器官,皮肤可以调节体温并感知周围环境。它能保护体内组织和器官免受物理和化学伤害,以及来自致病微生物的侵害。皮肤的伤口修复过程是复杂和费时的,且任何修复过程的干扰都可能加重病情,并延迟伤口愈合。难治性的伤口也会导致病原体的入侵,导致继发感染、水和电解质紊乱、传染性休克、器官衰竭甚至死亡。为了改善康复过程,并减少在伤口愈合过程中出现的并发症,有效且快速地促进伤口愈合是至关重要的。目前,已知的几种创伤修复药物都存在一定的缺陷,包括稳定性差、活性低、存储成本高、疤痕增生等。因此,功能多样、活性高、稳定性高、特性专一的生物活性肽具有很高的探索价值。

两栖动物作为一种皮肤裸露且栖息地复杂的物种,很容易受到外部伤害,因而,它们形成了一种保护性的皮肤防御系统。之前关于两栖动物分泌物的研究已经确定了多种功能多样的生物活性肽,包括抗菌肽、抗氧化肽、伤口愈合肽、细胞因子、神经调节肽和神经毒素等。值得注意的是,两栖动物的皮肤在受损后可以迅速愈合,而且很少留疤,这表明了两栖动物皮肤分泌物中存在某种可以缩短伤口愈合的过程物质。

我们在研究中发现臭蛙可以分泌多种生物活性肽。因此,本发明提供了一种来源于云南臭蛙(Odorrana andersonii)皮肤分泌物的具有促皮肤创伤修复的活性多肽OA-FF10及其提纯方法和应用。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种多肽OA-FF10,所述多肽OA-FF10包含的氨基酸序列如SEQ No.1所示。

本发明的第二目的在于提供一种所述多肽OA-FF10的提纯方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)用电刺激法取云南臭蛙活体皮肤分泌物,溶解于PBS,真空冷冻干燥,获得皮肤分泌物冻干粉-80℃保存备用;

(2)将所述冻干粉用Sephadex G75排阻层析进行分离;

(3)将步骤(2)的分离产物进行第一次高效液相色谱反相层析,并收集具促创伤修复功能的活性组分;

(4)将所述活性组分进行第二次高效液相色谱反相层析,得到纯化的修复肽OA-FF10。

本发明的第三目的在于提供所述多肽OA-FF10的应用,所述多肽OA-FF10可促进体表皮肤创伤愈合,减少疤痕产生。

本发明的第四目的在于提供一种含有所述多肽OA-FF10的促皮肤创伤愈合的药品。

本发明的第五目的在于提供一种含有所述多肽OA-FF10的护肤品。

附图说明

图1为的第一次HPLC反相C18柱层析图;

图2为多肽OA-FF10的第二次HPLC反相C18柱层析图;

图3 为多肽OA-FF10的动物模型促创伤修复活性图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步的说明,但不以任何方式对本发明加以限制,基于本发明教导所做的任何变换或替换,均属于本发明的保护范围。

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