[发明专利]一种多肽OA-GL21及其提纯方法与应用

说明书

本发明公开了一种促皮肤创伤愈合的修复多肽OA‑GL21，所述多肽OA‑GL21包含的氨基酸序列如SEQ No.1所示。本发明还公开了所述多肽OA‑GL21的提纯方法和应用。本发明所述皮肤创伤修复肽OA‑GL21可加速体表皮肤的创口愈合，减少疤痕产生，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种多肽OA-GL21及其提纯方法与应用。

背景技术

皮肤作为人体和外界环境之间的物理屏障，承担着诸如排汗、热感、痛觉等重要的生理功能，但与此同时，皮肤也最易受到各种物理、化学等因素的影响而造成破裂和感染等损伤。皮肤受损后的快速愈合是机体内环境稳态重建的重要先决条件，但这个过程容易受到各种因素影响，导致创伤修复的延缓，造成难愈合性慢性创伤，为病原微生物的入侵和繁殖创造条件，从而引起继发性败血症，水电解质紊乱，感染性休克，多器官衰竭甚至死亡等危害，给患者造成严重的生理和经济负担。因此，寻找效果较好的新型促创面愈合药物已经成为亟待解决的问题。跟传统的创伤修复药物（如云南白药、生长因子制剂等）相比，多肽类分子具有高活性、高特异性及高稳定性等特性，目前已有各种两栖动物来源的活性多肽如抗菌肽、抗氧化肽、镇痛肽等得以发现，但关于高活性的促创伤修复肽的报道还略显不足。

两栖动物生活环境复杂，在长期的自然选择过程中，两栖动物逐渐进化出了独特、高效的皮肤多肽防御系统，比如抵御病原微生物侵袭的抗菌肽、防止强氧化损伤的抗氧化多肽等。广泛的研究表明，两栖动物皮肤损伤后能够快速的修复，由此，我们猜测其皮肤中存在必要的物质基础来促进创伤修复：两栖动物皮肤分泌物具有很强的促创伤修复活性，但具体的作用分子还知之甚少。到目前为止，仅有少数关于两栖动物皮肤分泌物中促创伤修复活性多肽的报道，因此，对于两栖动物促创伤修复肽的研究仍有局限性并且需要更深入的研究。

我们在研究中发现臭蛙可以分泌多种生物活性肽。因此，本发明提供了一种来源于云南臭蛙(Odorrana andersonii)皮肤分泌物的具有促皮肤创伤修复的活性多肽OA-GL21及其提纯方法和应用。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种多肽OA-GL21，所述多肽OA-GL21包含的氨基酸序列如SEQ No.1所示。

本发明的第二目的在于提供一种所述多肽OA-GL21的提纯方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）用电刺激法取云南臭蛙活体皮肤分泌物，溶解于PBS，真空冷冻干燥，获得皮肤分泌物冻干粉-80℃保存备用；

（2）将所述冻干粉用Sephadex G75排阻层析进行分离；

（3）将步骤（2）的分离产物进行第一次高效液相色谱反相层析，并收集具促创伤修复功能的活性组分；

（4）将所述活性组分进行第二次高效液相色谱反相层析，得到纯化的修复肽OA-GL21。

本发明的第三目的在于提供所述多肽OA-GL21的应用，所述多肽OA-GL21可促进体表皮肤创伤愈合，减少疤痕产生。

本发明的第四目的在于提供一种含有所述多肽OA-GL21的促皮肤创伤愈合的药品。

本发明的第五目的在于提供一种含有所述多肽OA-GL21的护肤品。

附图说明

图1为的第一次HPLC反相C₁₈柱层析图；

图2为多肽OA-GL21的第二次HPLC反相C18柱层析图；

图3 为多肽OA-GL21的动物模型促创伤修复活性图。

具体实施方式