[发明专利]一种金银花和山银花的鉴别方法

说明书

本发明涉及化学分析技术领域，特别涉及一种金银花和山银花的鉴别方法：待检样品提取液使用液相色谱仪和DAD检测器进行检测。此方法具有简便、高效、经济、环保等优点，无需任何对照物质或高毒有机化学试剂。该方法不但可以用于中药材，也可以用于含金银花制剂中的金银花真伪或掺伪检验，具有很高的应用价值。

技术领域

本发明涉及化学分析技术领域，特别涉及一种金银花和山银花的鉴别方法。

背景技术

金银花和山银花均是临床常用的清热解毒类中药，现行2015年版《中国药典》规定其药用部位均为干燥花蕾或初开的花。因金银花和山银花的性味与归经、功能与主治和用法与用量完全一致，而且性状具有较高的相似性，但金银花的价格远高于山银花，故市场上山银花冒用为金银花的现象较为严重。从近年来全国各地的中药饮片不合格情况的统计数据来看，金银花不合格率高达30%，主要不合格原因就是对金银花进行部分或全部掺伪（主要伪品为山银花）后进行销售使用，故急需建立一种金银花和山银花的鉴别方法。

目前已知的山银花区别于金银花的主要差异性化学成分为川续断皂苷乙和灰毡毛忍冬皂苷乙。对金银花和山银花进行鉴别研究的主要方法有显微鉴别法、薄层色谱法、液相色谱-蒸发光法、PCR生物法等。

如CN105606734A中公开了一种快速高分离度液相色谱检测金银花和山银花药材的方法，通过液相色谱蒸发光散射检测器检测皂苷类化合物达到鉴别的目的。液相色谱-蒸发光法需要使用实验室不常配备且价格昂贵的蒸发光检测器法进行试验，还需要使用昂贵的对照物质。

CN103290127A公开了一种使用PCR方法鉴别金银花与山银花的技术。PCR生物法则对试验条件要求比较苛刻，并且需要使用昂贵的仪器、多种化学试剂和对照物质。

显微鉴别法和薄层鉴别法因金银花和山银花具有高度相似的鉴别特征，而很难将两者区分开来。故急需建立一种简便、经济的金银花和山银花的鉴别方法。

发明内容

为了解决以上现有技术中金银花和山银花鉴别中存在的区分难度大、鉴别效果不好、方法操作难度大、成本高等问题，本申请提供了一种简便、经济的金银花和山银花的鉴别方法，无需任何对照物质，规定色谱主峰为参照峰，根据规定相对保留时间范围内色谱峰有无来鉴别金银花和山银花的方法。

本发明是通过以下步骤得到的：

一种金银花和山银花的鉴别方法，包括以下步骤：

（1）待检样品制备：将待检样品使用有机溶剂提取，得提取液；

（2）提取液使用液相色谱仪和DAD检测器进行检测，色谱条件如下：

色谱柱Agilent ZORBAX Extend- C18色谱柱，4.6×250mm，5µm；柱温15-40℃；流速0.9-1.10mL/min；以乙腈为流动相A，以0.5%磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱，0～5 min，5%流动相A，5～20 min, 5→9% 流动相A，20～64 min，9→21%流动相A，64～80 min，21→30%流动相A，80～95 min，30→80%流动相 A，95～106 min，80→5% 流动相A；DAD检测器（波长201nm）；

（3）以主峰（绿原酸峰）为参照峰，在相对保留时间4.310-4.355范围内，出现1个色谱峰，则判该待检样品中含有山银花。