[发明专利]一种用于蛋白质分离的聚合物磁珠制备方法

权利要求书

1.一种用于蛋白质分离的聚合物磁珠制备方法，其特征在于，是通过微乳液自组装的方法制备得到，具体包括以下步骤：

(1)称取5～20mg含羧基的刚性两亲嵌段共聚物溶于0～2mL四氢呋喃中，随后加入1.5～10mL二氯甲烷，配成均相溶液；

(2)称取2～20mg超顺磁性Fe₃O₄纳米粒子，加入步骤(1)中得到的均相溶液中并超声分散，得到混合液；

(3)将步骤(2)得到的混合液加入至10～50mL含1～10mg/mL的十二烷基磺酸钠(SDS)/水溶液中，20～30℃下连续搅拌12～24h至溶剂挥发完全，多次离心及纯水洗涤，最后分散在水中，得到磁性复合微珠；

(4)将步骤(3)中制备得到的磁性复合微珠转移至pH为7.4的PBS缓冲液中，向其中加入50～100mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)与150～250mM的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，室温静置15-30min后，采用磁性分离收集活化磁珠；

(5)将上述活化磁珠重新分散PBS缓冲液中，向其中加入0.02-0.1mg/mL的兔抗鼠IgG抗体溶液，在室温静置15-30min后，磁分离洗涤后获得表面偶联抗体的用于蛋白质分离的聚合物磁珠。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述溶剂四氢呋喃也可用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或者二甲基亚砜(DMSO)替换。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述含羧基的刚性两亲嵌段共聚物可以是共聚聚芳醚。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，可通过改变超顺磁性Fe₃O₄纳米粒子的包埋量来调整磁性共聚聚芳醚微球的磁性能。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述超声分散的参数为：室温超声分散10分钟。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述多次离心及纯水洗涤具体操作为：

室温离心3min，离心速度10000rpm，去掉上清液，加入25mL水后分散均匀后，重复上述步骤。