[发明专利]一种倍半萜烯醇类化合物及其制备和应用

说明书

本发明涉及抑藻剂领域，具体地说是一种海藻附生真菌来源的倍半萜烯醇类化合物及其制备方法和在抑制微藻方面的应用。具体结构式如(I)所示，其制备方法为将海藻附生真菌绿木霉(Trichoderma virens)Y13‑3接种于真菌培养基中发酵培养，发酵产物经分离纯化后，即为式(I)所示的倍半萜烯醇类化合物。本发明获得的倍半萜烯醇类化合物，经抑微藻活性实验得出化合物对微藻的半数抑制浓度可达1.2微克/毫升。

技术领域

本发明涉及抑藻剂领域，具体地说是一种海藻附生真菌来源的倍半萜烯醇类化合物及其制备方法和在抑制微藻方面的应用。

背景技术

世界范围内，近海赤潮灾害日益加剧，严重阻碍海洋渔业、近岸旅游和海洋经济的发展。2000年以后我国进入赤潮高发期，赤潮发生频率和危害程度明显增加。赤潮的主要危害形式有四种，一是破坏海洋生态平衡；二是破坏海洋渔业资源；三是危害人类健康；四是影响海洋旅游业的发展。据统计，每年由赤潮造成的经济损失高达10亿元以上。海洋中可引发赤潮的微藻约有300种，其中有毒赤潮藻约80种。科学有效地预防和治理赤潮是当今世界性难题之一。

目前，赤潮的防治对策除了防止海水富营养化外，还要遏制赤潮生物即赤潮藻的发展，而遏制赤潮藻发展的方法主要为化学药剂治理。虽然化学药剂如硫酸铜、氯气等快速、有效地杀死或抑制有害藻类或抑制其生长繁殖，但存在对非赤潮生物的危害、药物残留以及对环境的二次污染等问题。

与治理赤潮中使用的传统的化学药剂相比，海洋生物源天然药物具有针对性强、安全性高、活性显著且对环境友好的优点，为解决目前由赤潮藻引发的赤潮的防治问题提供了新的思路。

发明内容

本发明的目的是提供一种倍半萜烯醇类化合物及其制备和应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种倍半萜烯醇类化合物，倍半萜烯醇类化合物结构如式(I)所示

一种倍半萜烯醇类化合物的制备方法，将绿木霉(Trichoderma virens)Y13-3接种于真菌培养基中发酵培养，发酵产物经纯化后，即为式(I)所示的倍半萜烯醇类化合物；所述的绿木霉(Trichoderma virens) Y13-3于2018年1月10日保存于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC NO:M 2018016；

具体制备步骤：

1)将绿木霉(Trichoderma virens)Y13-3接种于真菌培养基中发酵10-60天，而后经有机溶剂提取并浓缩，即为粗提物；

2)取步骤1)中的粗提物进行硅胶柱层析，用有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液经薄层层析检测；

3)收集步骤2)中洗脱组分再依次经反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和薄层层析分离纯化，即得如式(I)所示的倍半萜烯醇类化合物。

所述步骤1)中真菌培养基为马铃薯葡萄糖液体培养基、大米固体培养基、麦芽汁培养基或菊芋葡萄糖液体培养基；优选为：马铃薯葡萄糖液体培养基。

有机溶剂提取液为二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇中一种或几种；优选为：乙酸乙酯。

所述步骤2)中的有机溶剂为体积比50-0∶1的石油醚-乙酸乙酯、石油醚-乙醇、石油醚-丙醇、石油醚-异丙醇、二氯甲烷-乙酸乙酯、二氯甲烷-甲醇、二氯甲烷-乙醇、二氯甲烷-丙醇、二氯甲烷-异丙醇一组或几组。

所述步骤3)所述反相硅胶柱层析洗脱液为体积比5-0∶1的水-甲醇或水-乙醇；凝胶柱层析洗脱液为体积比2-0∶1的二氯甲烷-甲醇或二氯甲烷-乙醇；薄层层析展开剂为体积比为10-0∶1的石油醚-乙酸乙酯、石油醚 -乙醇或二氯甲烷-乙酸乙酯。