[发明专利]一种环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法

权利要求书

1.一种环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法，其特征在于：所述的微生物发酵液为大肠杆菌发酵液；

包括以下步骤：

（1）胞苷发酵液加热后经陶瓷膜固液分离、超滤膜超滤连续式预处理得到预处理液，其中，陶瓷膜过滤精度为0.05μm-0.8μm；超滤膜过滤精度为800-2000道尔顿；

（2）将预处理液调酸后经过浓缩、调酸、醇沉结晶、过滤得到胞苷盐酸盐粗品；

（3）胞苷盐酸盐粗品经复溶、调碱、活性炭脱色、过滤得到脱色液；脱色液经电渗析除盐、减压浓缩、醇沉结晶、过滤、淋洗、真空干燥得到胞苷成品。

2.根据权利要求1所述的环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法，其特征在于：将所述步骤（2）中的胞苷盐酸盐粗品的过滤液以及步骤（3）中的过滤液和淋洗液再重复步骤（2）、（3）进行胞苷精制。

3.根据权利要求1所述的环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法，其特征在于：所述步骤（1）中胞苷发酵液加热温度为70-90℃，加热时间30-60min。

4.根据权利要求1所述的环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法，其特征在于：所述步骤（2）中预处理液浓缩至胞苷浓度为300-500g/L，用盐酸调节pH至0.5-1.5；所述步骤（3）中胞苷盐酸盐粗品复溶浓度为50-150g/L，用氢氧化钠溶液调节pH7.0-7.5。

5.根据权利要求1所述的环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法，其特征在于：所述活性炭为723、727、767药用活性炭、303糖用活性炭中的一种或几种，用量为0.05-0.2%，脱色温度为40-80℃，脱色时间为30-60min。

6.根据权利要求1所述的环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法，其特征在于：所述步骤（3）中胞苷脱色液电导率小于1ms/cm为电渗析终点。

7.根据权利要求1所述的环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法，其特征在于：所述步骤（3）中胞苷醇沉结晶浓度为300-500g/L；结晶条件是：加入料液体积1-3倍的甲醇或者乙醇，于4-15℃、120-250rpm的条件下搅拌6-24h；晶体过滤后用80-90%甲醇或者乙醇按体积比1:1淋洗；所述真空干燥温度为45-60℃。

8.根据权利要求1所述的环保型从微生物发酵液中分离纯化胞苷的方法，其特征在于：所述超滤膜为中空纤维超滤膜，膜材料为聚醚砜；超滤温度为30-45℃，超滤压力为0.7-1.2MPa。