[发明专利]用于修复重金属污染土壤的微生物制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于修复重金属污染土壤的微生物复合制剂，其特征在于，该复合微生物菌剂包括沼泽红假单胞菌 DSM5859菌剂、植物乳杆菌NJ2205菌剂、枯草芽孢杆菌BNCC188062菌剂和固定化耐高温α-淀粉酶。

2.根据权利要求1所述的用于修复重金属污染土壤的微生物制剂，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌 DSM5859菌剂、植物乳杆菌NJ2205菌剂、枯草芽孢杆菌BNCC188062菌剂重量比为0.5：1：1~2：3：5。

3.根据权利要求1所述的用于修复重金属污染土壤的微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂中，所述沼泽红假单胞菌 DSM5859菌剂的活菌含量为1×10⁸~5×10¹⁰ cfu/g，植物乳杆菌NJ2205菌剂菌剂的活菌含量为3×10⁹~8×10¹⁰ cfu/g、所述枯草芽孢杆菌BNCC188062菌剂4×10⁹~7×10¹⁰ cfu/g。

4.根据权利要求1所述的用于修复重金属污染土壤的微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂中，所述固定化耐高温α-淀粉酶浓度为15~30U/mg。

5.一种制备权利要求1~4中任意一项所述的用于修复重金属污染土壤的微生物制剂的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1）将沼泽红假单胞菌 DSM5859菌剂、植物乳杆菌NJ2205菌剂、枯草芽孢杆菌BNCC188062菌剂按照0.5：1：1~2：3：5的质量比混合均匀得到复合菌剂；

2）向步骤1）制得的复合菌剂中加入所述固定化耐高温α-淀粉酶，混合均匀，即得所述用于修复重金属污染的土壤的微生物制剂。

6.根据权利要求5所述的制备用于修复重金属污染土壤的微生物制剂的方法，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌 DSM5859菌剂的制备方法包括：将沼泽红假单胞菌 DSM5859培养到对数期，然后按培养基体积3%~6%的接种量将培养到对数期的菌种接种到培养基中，30~35℃下，摇床震荡180~220rpm，培养48~72小时，得到沼泽红假单胞菌 DSM5859的发酵液，向该发酵液中加入吸附剂，干燥，即得沼泽红假单胞菌 DSM5859菌剂；所述吸附剂为膨润土或活性炭一种或几种。

7.根据权利要求6所述的制备用于修复重金属污染土壤的微生物制剂的方法，其特征在于，所述培养基为酵母膏、乙酸钠、MgSO₄、K₂HPO₄、蛋白胨、蛋氨酸配制而成的培养基。

8.根据权利要求5所述的所述的制备用于修复重金属污染土壤的微生物制剂的方法，其特征在于，所述植物乳杆菌NJ2205菌剂的制备方法包括：将植物乳杆菌NJ2205培养到对数期，然后按培养基体积3%~6%的接种量将培养到对数期的菌种接种到LB液体培养基中，35~37℃下，摇床震荡150~220rpm，培养36~48小时，加入吸附剂，干燥，制得植物乳杆菌NJ2205菌剂；所述吸附剂为膨润土或活性炭中的一种或几种。

9.根据权利要求5所述的所述的制备用于修复重金属污染土壤的微生物制剂的方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌BNCC188062菌剂的制备方法包括：将枯草芽孢杆菌BNCC188062菌剂培养到对数期，然后按培养基体积6%~10%的接种量将培养到对数期的菌种接种到LB液体培养基中，30~35℃下，摇床震荡120~150rpm，培养36~48小时，加入吸附剂，干燥，制得枯草芽孢杆菌BNCC188062菌剂；所述吸附剂为膨润土或活性炭中的一种或几种。

10.权利要求1~4中任意一项所述的用于修复重金属污染土壤的微生物制剂的方法在重金属污染土壤修复中的应用。