[发明专利]昆布多糖的制备及在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

昆布多糖的制备及在制备抗肿瘤药物中的应用，属于植物活性成分的药物医疗和保健应用领域。依次采用纯水提取、醇沉、Sevag法脱蛋白、透析分离纯化，然后浓缩冷冻干燥。昆布多糖中多糖含量为≥93.9％，且昆布多糖中不含有蛋白质；肿瘤包括Hela(人宫颈癌细胞)，SH‑SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)，MCF‑7(人乳腺癌细胞)，U266(人骨髓瘤细胞)、RAW264.7(小鼠腹腔巨噬细胞细胞)等。本发明将昆布多糖用于抗癌药物的制备，以供癌症的治疗使用。

技术领域

本发明涉及一种昆布多糖的抗肿瘤作用，属于海洋藻类活性成分的药物医疗和保健应用领域。

背景技术

白血病(Leukemia)，亦称作血癌，是一种造血系统的恶性肿瘤。病源是由于细胞内脱氧核糖核酸的变异形成的骨髓中造血组织的不正常工作。骨髓中的干细胞每天可以制造成千上万的红血球和白细胞。白血病病人过分生产不成熟的白细胞，妨害骨髓的其他工作，这使得骨髓生产其它血细胞的功能降低。白血病可以扩散到淋巴结、脾、肝、中枢神经系统和其它器官。

多糖(又名多聚糖)，一般指由个以上的单糖通过糖苷键链接而成的大分子化合物，如纤维素、半纤维素、树胶、糖元等。多糖具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辅射、抗病毒、抗炎、抗疲劳、抗衰老等生理活性。

昆布(又名海带)是一类生活在海洋中的隐花植物类群，其主要含有多糖、天然蛋白质、纤维素、脂肪、矿物质及核酸等，是中国、日本、印度、韩国等国家的日常生活食材之一。现代药理研究表明，昆布中含有褐藻、褐藻淀粉、褐藻糖胶等在方面发挥着重要作用。因此从昆布中分离和寻找具有良好的生理活性的多糖也就成为了国内外专家和学者争先研究的热点。

发明内容

本发明的目的是提供一种昆布多糖的制备及在制备抗肿瘤药物方面的新用途。

本发明的技术方案为：对昆布进行多糖提取，再将提取的多糖作用于Hela(人宫颈癌细胞)，SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)，MCF-7(人乳腺癌细胞)，U266(人骨髓瘤细胞)、RAW264.7(小鼠腹腔巨噬细胞细胞)等肿瘤细胞。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种昆布多糖的制备及在抗肿瘤中的应用。

本发明所提供的昆布多糖，经测试具有一定的抗肿瘤活性，在体外给药0.043-1.4mg/mL范围内可抑制多种肿瘤细胞的生长，且呈现明显的量效关系。

本发明一种昆布多糖的制备，包括以下步骤：

1)昆布粗多糖提取：

秤取干燥昆布粉，按一定料液比加入缓冲液和酶，在一定温度和pH下酶解一段时间后，升温90℃灭酶；然后加入碳酸钠溶液进行消化；减压抽滤，取滤液，用盐酸使昆布多糖以胶态析出，静置过夜，然后再向静置液中缓缓加入盐酸，调pH 1.0～2.0后过滤；在常温下，边搅拌边向过滤固体中加入碳酸钠溶液溶解胶块，至中和完成；向中和后的溶液中加入无水乙醇析出沉淀；过滤，沉淀物于烘箱中干燥，即得昆布粗多糖；

每1.0g昆布粉对应20-50ml缓冲溶液；上述缓冲溶液可为：磷酸氢二钠-磷酸二氢钠-磷酸、柠檬酸-柠檬酸钠、醋酸-醋酸钠的缓冲溶液；

上述酶选自：果胶酶、纤维素酶、木聚糖酶中的一种或几种；

上述酶的质量浓度为：0.45～0.6g/L；

上述酶解时温度可为：35～55℃；

上述酶解时pH值为：5～6.5；

上述酶解时间可为：2～4h；

边搅拌边加入2％碳酸钠溶液溶解胶块。

每1.0g昆布粉对应加入2wt％碳酸钠溶液40ml于55℃消化2.0h。2)蛋白酶-Sevag法脱蛋白：