[发明专利]一种忍冬提取物的提取方法及其应用

说明书

本发明涉及活性物质的提取方法，特别涉及一种忍冬提取物的提取办法及其应用。提取物为将忍冬为原料依次经醇提、旋蒸进行提取，而后经甲醇溶解。本发明通过实验证实了忍冬抗肿瘤活性成分(LJ‑3)能够抑制人宫颈癌细胞系SiHa细胞，Hela细胞和Caski细胞的增殖。由本发明的方法提取得到的忍冬抗肿瘤活性物质，具有明显的抗肿瘤活性作用，对于肿瘤疾病的治疗提供了一种新的技术手段。

技术领域

本发明涉及活性物质的提取方法，特别涉及一种忍冬提取物的提取方法及其应用。

背景技术

忍冬是具有悠久历史的常用中药之一，又名金银花、鹭鸳花、银花、金藤花、双苞花等。忍冬有非常久的使用历史，始见于李时珍的“本草纲目”，而且药用价值和保健用途非常广泛，已被“中国药典”收录。其功效主要是清热解毒，消炎退肿，外感风热或温病发热，中暑，热毒血痢，痈肿疔疮，喉痹，多种感染性疾病等。

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，发病原因多样化，但是90％以上的宫颈癌伴有高危型HPV感染。现有癌症尤其是宫颈癌临床治疗办法主要为手术，放疗和化疗等办法。手术对病人的身体和心理的产生的伤害非常巨大，难以恢复；放疗的适用性较差，较大的实体瘤和大面积的照射都不适用，且容易造成感染；而一般的化疗药物都存在一定的细胞毒性，对消化系统，骨髓功能及肝肾功能都有较大的损伤，并且极易产生耐药性。因此需要提供一种特异性较高，毒副作用小，经济实惠并且抗肿瘤效果好的药物来改善或解决目前宫颈癌治疗的问题。

发明内容

本发明目的在于提供一种忍冬提取物及其提取物和应用。

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：

一种忍冬提取物，以忍冬为原料依次经醇提、旋蒸进行提取，而后经甲醇溶解即得忍冬提取物。

进一步的说：

1)醇提：将忍冬经筛除尘，而后经过量的无水乙醇与75％乙醇交替多次浸泡，浸泡后经超声破碎，过滤，收集滤液，待用；

2)旋蒸：将上述收集的滤液置于4℃过夜，自然沉淀，取上清过滤，然后经真空旋转蒸发，将蒸发后物质用10％的甲醇溶液溶解，即得忍冬提取物。

所述步骤1)取忍冬经筛除尘，除尘后用自来水清洗3-6遍，再用蒸馏水洗2-4遍，清洗后将其浸泡至过量的无水乙醇或75％乙醇中，交替浸泡3-4次，而后将浸泡液混合，过滤，置4℃冰箱保存备用；其中，一次交替浸泡为将忍冬浸泡至过量的无水乙醇中超声浸泡0.5-1h，而后取出忍冬再置于过量的75％乙醇中进行超声浸泡0.5-1h。

所述醇提过滤为真空抽滤；所述真空旋转蒸发为于40-45℃水浴，真空条件下旋转蒸发4-5h；所述旋蒸过滤为用0.22um的滤膜进行无菌过滤。

一种忍冬提取物的提取方法：

1)醇提：将忍冬经筛除尘，而后经过量的无水乙醇与75％乙醇交替多次浸泡，浸泡后经超声破碎，过滤，收集滤液，待用；

2)旋蒸：将上述收集的滤液置于4℃过夜，自然沉淀，取上清过滤，然后经真空旋转蒸发，将蒸发后物质用10％的甲醇溶液溶解，即得忍冬提取物。

所述步骤1)取忍冬经筛除尘，除尘后用自来水清洗3-6遍，再用蒸馏水洗2-4遍，清洗后将其浸泡至过量的无水乙醇或75％乙醇中，交替浸泡3-4次，而后将浸泡液混合，过滤，置4℃冰箱保存备用；其中，一次交替浸泡为将忍冬浸泡至过量的无水乙醇中超声浸泡0.5-1h，而后取出忍冬再置于过量的75％乙醇中进行超声浸泡0.5-1h。

所述真空旋转蒸发为于40-45℃水浴，真空条件下旋转蒸发4-5h；所述旋蒸过滤为用0.22um的滤膜进行无菌过滤。

一种忍冬提取物的应用，所述提取物作为制备抗肿瘤制剂中的应用。

所述肿瘤为宫颈癌，肺癌或肝癌。