[发明专利]通过靶向肿瘤相关巨噬细胞递送抑制肿瘤生长的miRNA的药物及应用

说明书

本发明提供一种通过靶向肿瘤相关巨噬细胞递送抑制肿瘤生长的miRNA的药物及应用。包括靶向肿瘤相关巨噬细胞的药物载体以及包裹在该药物载体内的miRNA和带有甘露糖残基的阳离子化多糖，所述miRNA的序列如SEQ.ID.NO.1或SEQ.ID.NO.2所示。本发明通过体外实验发现了miR‑99b‑5p可促进巨噬细胞M1型活化并抑制其M2型活化，运用靶向TAMs的纳米材料包裹miRNA，直接通过尾静脉输送给肝癌小鼠模型，发现靶向TAMs递送miRNA可显著抑制肿瘤的生长，而且靶向TAMs递送miR‑99b‑5p的抑制肿瘤生长作用优于递送其它miRNA，如miR‑125a。

技术领域

本发明涉及肿瘤医学领域，具体涉及靶向肿瘤相关巨噬细胞递送miRNA抑制肿瘤生长的作用。

背景技术

巨噬细胞可大体上分为经典活化的M1型巨噬细胞和替代活化的M2型巨噬细胞，前者可由LPS和IFN-γ等诱导产生，高表达标志分子IL-12、TNF-α和IL-6等，发挥清除细菌、抗原提呈、促进炎性反应以及抗肿瘤等作用；后者可由IL-4等诱导产生，高表达标志分子甘露醇受体(mannose receptor，MR)、精氨酸酶-1和IL-10等，发挥抵御寄生虫感染、促进组织修复、抑制炎性反应以及促肿瘤等作用。肿瘤内的巨噬细胞，又称肿瘤相关巨噬细胞(Tumour-associated macrophages，TAMs)，是肿瘤炎症微环境的重要组成部分。在大多数的肿瘤组织中，TAMs的密度与肿瘤患者不良预后密切相关。TAMs在功能上类似于M2型巨噬细胞，可通过抑制抗肿瘤免疫反应和调节促肿瘤的炎性细胞等方式促进肿瘤的发生发展。已有研究证实，抑制M2样TAMs和/或促进M1样TAMs的功能能够抑制肿瘤的进展。

微小RNA(microRNA，miRNA)是长度约为22个核苷酸的非编码RNA，其通过与靶基因mRNA 3'-非翻译区(3'-untranslated region，3'-UTR)结合，抑制靶基因蛋白翻译，进而调控细胞的生物学功能。MicroRNA存在多种形式，最原始的是pri-miRNA，长度大约为300～1000个碱基；pri-miRNA经过一次加工后，成为pre-miRNA即microRNA前体，长度大约为70～90个碱基；pre-miRNA再经过Dicer酶酶切后，成为长约20～24nt的成熟miRNA。miRNA在细胞分化、生物发育及疾病发生发展过程中发挥巨大作用，引起研究人员越来越多的关注。随着对于miRNA作用机理的进一步的深入研究，以及利用最新的例如miRNA芯片等高通量的技术手段对于miRNA和疾病之间的关系进行研究，将使mi RNA可能成为疾病诊断的新的生物学标记，还可能使得这一分子成为治疗靶点，或是模拟这一分子进行新药研发。

目前，传统的抗肿瘤分子靶向药物面临副作用大、易产生耐药性等缺陷，因而寻找靶向TAMs治疗肿瘤的药物显得尤为重要。目前仅见到少量具有选择性活化TAMs功能的miRNA(例如，MIMAT0000135)的报道，但仅发现其针对某些癌症，例如肺癌的抑制肿瘤生长的活性，而且将其实际应用于临床体内抗肿瘤的靶向药物还有待进一步研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通过靶向肿瘤相关巨噬细胞递送抑制肿瘤生长的miRNA的药物及应用。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种通过靶向肿瘤相关巨噬细胞递送抑制肿瘤生长的miRNA，该miRNA的序列如SEQ.ID.NO.1所示。

一种通过靶向肿瘤相关巨噬细胞抑制肿瘤生长的药物，包括靶向肿瘤相关巨噬细胞的药物载体以及包裹在该药物载体内的miRNA和可通过静电作用与miRNA结合的带有甘露糖残基的阳离子化多糖，所述miRNA的序列如SEQ.ID.NO.1或SEQ.ID.NO.2所示。

优选的，所述药物载体选自经过聚乙二醇修饰的组氨酸海藻酸盐。