[发明专利]一种具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂及其制备方法

权利要求书

1.一种具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂，其特征在于：诊疗试剂由苯环类抗癌药物、石墨烯量子点和以AS1411为模板制备的银纳米簇制成，其中石墨烯量子点与银纳米簇复合成GOD/AS1411-Ag纳米材料，通过π-π堆垛作用将苯环类抗癌药物负载在GOD/AS1411-Ag纳米材料上制成诊疗试剂。

2.根据权利要求1所述的具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂，其特征在于：所述苯环类抗癌药物为阿霉素或甲氨蝶呤。

3.权利要求1或2所述的具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂的制备方法，其特征在于步骤如下：

（1）将AS1411溶于钾离子缓冲溶液得到AS1411溶液，在混合冰浴下，将硝酸银溶液加入到AS1411溶液中，震荡反应20-30min后得到混合溶液，向混合溶液中加入硼氢化钠溶液，避光条件下于恒温摇床反应3-5h得到AS1411银纳米簇；

（2）将石墨粉加入到硫酸和硝酸的混合溶液中，超声反应2-3.5h后于100℃条件下搅拌反应24h；反应结束后，冷至室温，用去离子水稀释至500-1000mL，调节pH值为8，旋转蒸发除去水，将所得的滤液在透析袋中透析4天得到石墨烯量子点溶液；将氢氧化钠和氯乙酸钠加入到石墨烯量子点溶液中，超声反应2-4h，然后在透析袋中透析4天，得到表面羧基化的GOD水溶液；

（3）将含氨基的阳离子高分子溶液逐滴加入到步骤（2）中得到的表面羧基化的GOD水溶液中，超声混合5-10min后，分两次加入EDC.HCl，室温搅拌反应24-48h，然后再依次加入尿素和氯化钠，继续反应30-60min后离心5-10min，最后将上层溶液转移至透析袋中透析4天，得到聚阳离子修饰的GQD水溶液；

（4）将步骤（1）得到的AS1411银纳米簇与步骤（3）中的聚阳离子修饰的GQD水溶液分别稀释后混合，在恒温培养摇床上反应2-4h得到GOD/AS1411-Ag复合纳米材料；

（5）向步骤（4）得到的GOD/AS1411-Ag复合纳米材料中加入含苯环类抗癌药物溶液，避光条件下反应4-24h，然后将反应液转移到透析袋中透析4天，得到诊疗试剂。

4.根据权利要求3所述的具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中钾离子缓冲溶液的pH为7.4，钾离子缓冲溶液为KCl/K₃PO₄缓冲溶液或K₂HPO₄/KH₂PO₄缓冲溶液。

5.根据权利要求3所述的具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中AS1411溶液的浓度为0.05-1mg/mL；硝酸银、AS1411和硼氢化钠的摩尔比为6：1：1。

6.根据权利要求3所述的具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中硫酸和硝酸的体积比为3:1，氢氧化钠和氯乙酸钠的质量比为1:1，1ml石墨烯量子点溶液中加入0.3-0.5g氢氧化钠。

7.根据权利要求3所述的具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中含氨基的阳离子高分子溶液为浓度为6mg/mL的聚乙烯亚胺、壳聚糖、聚赖氨酸或多臂氨基聚乙二醇溶液；以10ml步骤（2）中得到的表面羧基化的GOD水溶液为基准，含氨基的阳离子高分子溶液的加入量为10mL，EDC两次的加入量为120mg，尿素和氯化钠的加入量均为1.0-1.5g。

8.根据权利要求3所述的具有SERS/荧光双模态靶向肿瘤细胞成像的诊疗试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中将1-5μLAS1411银纳米簇与1-10μL聚阳离子修饰的GQD水溶液分别稀释至1ml后混合。