[发明专利]血液中维生素A、E的提取检测方法

说明书

本发明公开了血液中维生素A、E的提取检测方法,包括以下步骤：S1、采集血清样本，向血清样本中加入提取试剂，置于漩涡振荡器混合，用高速离心机离心，吸取上层液体置于进样瓶中，进样分析；S2、选取5个已知浓度的维生素A、E的血清样品为质控品，向质控品中加入提取试剂，进样分析；S3、将质控品利用高效液相色谱法测定，将测定结果分析制成标准曲线；S4、将血液样本也通过高效液相色谱法测定，将测定结果根据标准曲线计算待测血清样品的维生素A和E的浓度。本发明通过直接用有机溶剂提取进样，有机层选用的提取溶剂不易挥发，减少了因溶剂挥发造成了浓度不准，能够确保维生素A、E的检测精度，缩短了检测时间，提高了检测效率。

技术领域

本发明涉及血液检测技术领域，尤其涉及血液中维生素A、E的提取检测方法。

背景技术

维生素A具有促进生长，维持上皮组织如皮肤、黏膜、角膜等正常功能的作用，并参与视紫红质的合成；参与体内多个氧化过程，特别是不饱和脂肪酸的氧化，维生素E对生殖功能、脂质代谢等有影响，可使垂体前叶促性腺细胞分泌亢进，促进精子的生成和活动，使卵泡增加，增加卵巢机能，黄体细胞增大及增强黄体酮的作用，传统检测血清维生素A和E方法无论是采用的采用正己烷提取还是采用甲醇乙腈将血清的蛋白沉淀后，用氮吹仪吹干溶剂后，再用流动相溶解进样，操作比较繁琐，不适合临床的快速检验。

因此，我们提出了血液中维生素A、E的提取检测方法用于解决上述问题。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的血液中维生素A、E的提取检测方法。

血液中维生素A、E的提取检测方法，包括以下步骤：

S1、采集血清样本10 ml，向血清样本中加入提取试剂，置于漩涡振荡器混合30 s，然后再用7000 rpm-9000 rpm的高速离心机离心8 min-15 min，吸取上层液体置于进样瓶中，进样分析；

S2、选取5个已知浓度的维生素A、E的血清样品为质控品，向质控品中加入提取试剂，充分混合后置于漩涡振荡器混合30 s，然后再用7000 rpm-9000 rpm的高速离心机离心8 min-15 min，吸取上层液体置于进样瓶中，进样分析；

S3、将质控品利用高效液相色谱法测定维生素A、E在特定波长下的光的吸收值，将测定结果分析制成标准曲线；

S4、将血液样本也通过高效液相色谱法测定维生素A、E在特定波长下的光的吸收值，将测定结果根据标准曲线计算待测血清样品的维生素A和E的浓度。

优选的，所述提取试剂为腈类化合物-醇类化合物-甲酸，其中腈类化合物为乙腈或丙腈或丁腈中的一种，醇类化合物为C4-C8的醇类化合物中的一种。

优选的，所述漩涡振荡器的型号为XH-C或XH-D。

优选的，所述高效液相色谱法采用5 cm的十八烷基键合硅胶柱为色谱柱，柱温为40 ℃，流速为1 ml/min，运行时间为7 min,流动相为水-乙腈相至乙腈-异丙醇相，其中水和乙腈的比例为60:40，乙腈和异丙醇的比例为80:20。

优选的，所述维生素A的检测波长为328 nm，维生素E的检测波长为296 nm。

优选的，所述高效液相色谱法的梯度方法为0 min-2.5 min为样品在水-乙腈相中流动，2.5 min-7 min为样品在乙腈-异丙醇相流动。

优选的，所述血液样本和质控品的处理条件相同。

本发明的有益效果是：

本发明，通过直接用有机溶剂提取进样，减少传统检测方法中的两个步骤，改善了传统方法的繁琐操作，有机层选用的提取溶剂不易挥发，减少了因溶剂挥发造成了浓度不准，能够确保维生素A、E的检测精度，缩短了检测时间，提高了检测效率。