[发明专利]分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法

权利要求书

1.分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于包括以下步骤：

1)壳聚糖的分批补料-氧化降解预处理，得降解液；

2)双氧水脱除；

3)壳聚糖的酶法水解与副反应抑制；

4)产物分离与干燥，得壳寡糖。

2.如权利要求1所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于在步骤1)中，所述壳聚糖的分批补料-氧化降解预处理的方法为：将壳聚糖粉末分散于水中，加入酸溶解，再加入双氧水反应，分批补加酸和壳聚糖，直到壳聚糖浓度达到6％～30％。

3.如权利要求2所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于所述将壳聚糖粉末分散于水中，按质量体积比将壳聚糖粉末分散于25～50倍水中，其中壳聚糖粉末按质量计算，水按体积计算。

4.如权利要求2所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于所述加入酸溶解是按照0.25～0.35mL酸/g壳聚糖；所述双氧水是加入质量终浓度为0.5％～10％；所述反应的温度为40～70℃；所述预处理的时间为10～60min。

5.如权利要求2所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于所述酸采用醋酸；所述分批补加酸和壳聚糖，是每次补加的壳聚糖量不超过壳聚糖的初始加入量，每次补料时间间隔为5～10min，使壳聚糖最终浓度达到6％～30％；氧化降解结束后，利用过氧化氢酶脱除体系中的双氧水直至淀粉-碘化钾试纸不变蓝，过氧化氢酶用量为0.0015～0.003g/mL。

6.如权利要求1所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于在步骤2)中，所述双氧水脱除的方法为：在步骤1)所得降解液中添加过氧化氢酶脱除残余双氧水，用量为0.0015～0.003g/mL预处理液，直至液体不能使KI-淀粉试纸变蓝。

7.如权利要求1所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于在步骤3)中，所述壳聚糖的酶法水解与副反应抑制的方法为：用氨水、氢氧化钠或氢氧化钾溶液中的一种调整步骤2)所得液体pH值4～6，按照壳聚糖质量的1％～20％添加壳聚糖水解酶，酶解过程通过添加亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、焦亚硫酸钠中的一种抑制褐变反应，抑制剂的用量为0.05～0.15g/g壳聚糖，反应温度40～60℃，反应时间4～24h，直至所需分子量。

8.如权利要求7所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于所述氨水、氢氧化钠或氢氧化钾溶液采用质量浓度为5～10M；所述酶包括壳聚糖酶、纤维素酶、半纤维素酶中的一种。

9.如权利要求1所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于在步骤4)中，所述产物分离与干燥的方法为：用氨水、氢氧化钠或氢氧化钾溶液中的一种调整步骤3)所得液体pH值至7，利用10～20kDa超滤膜脱除酶，干燥后获得壳寡糖。

10.如权利要求9所述分批补料-氧化预处理辅助酶水解壳聚糖制备壳寡糖方法，其特征在于所述干燥采用喷雾干燥、冷冻干燥、真空干燥中的一种。