[发明专利]一种碱基编辑工具及其应用有效
申请号: | 201810388981.X | 申请日: | 2018-04-26 |
公开(公告)号: | CN108715861B | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | 冯松杰;江雯;黄行许 | 申请(专利权)人: | 上海科技大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹;王婧 |
地址: | 200120 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 碱基 编辑 工具 及其 应用 | ||
1.一种碱基编辑工具,其特征在于,包括:多拷贝的GCN4与D10A-Cas9连接形成的GCN4-D10A载体;胞嘧啶脱氨酶APOBEC和尿嘧啶糖基化酶抑制物UGI连于单链抗体scFv形成的scFv-APOBEC-UGI载体或胞嘧啶脱氨酶APOBEC和尿嘧啶糖基化酶抑制物UGI以及防止多聚化的热稳定性结构域GB1连于单链抗体scFv形成的scFv-APOBEC-UGI-GB1载体。
2.如权利要求1所述的碱基编辑工具,其特征在于,所述的碱基编辑工具还包括sgRNA载体。
3.如权利要求1所述的碱基编辑工具,其特征在于,所述的碱基编辑工具还包括靶向特异位点的sgRNA。
4.如权利要求1所述的碱基编辑工具,其特征在于,所述的多拷贝的GCN4与D10A-Cas9连接形成的GCN4-D10A为10个拷贝的GCN4与D10A-Cas9连接。
5.如权利要求1所述的碱基编辑工具,其特征在于,所述的与D10A-Cas9连接的多拷贝GCN4招募scFv-APOBEC-UGI或scFv-APOBEC-UGI-GB1载体,在sgRNA的引导下在靶向位点做碱基编辑,进而增加靶向位点碱基编辑的窗口和准确性。
6.如权利要求1所述的碱基编辑工具在真核生物里做碱基编辑中的应用,其特征在于,所述应用为非诊断与治疗目的的应用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,包括:用于引入提前的终止密码子来做基因敲除、用于产生随机突变、用于蛋白进化、用于药物靶点筛选和用于基因组调控元件筛选中的至少一种。
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