[发明专利]一种唾液乳杆菌特异性培养基及其应用

说明书

本发明公开了一种唾液乳杆菌特异性培养基及其应用，该培养基是以MRS培养基为基础进行改良，其中，主要去除了牛肉膏，将碳源更换为鼠李糖，并加入了抗生素万古霉素和链霉素，该培养基配制简便，成本低廉，能分离培养唾液乳杆菌并对其进行活菌计数，该方法计数结果可靠，操作简单，对实验人员要求不高，同时在诸如人群肠道乳杆菌的分离筛选中能高效的提高唾液乳杆菌在样品中的丰度，从而极大的增加唾液乳杆菌的得率。本发明适用于制备培养分离唾液乳杆菌或对其进行活菌计数的培养基。

技术领域

本发明涉及一种唾液乳杆菌特异性培养基及其应用，属于微生物检测领域。

背景技术

唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)属于厚壁菌门乳杆菌属，菌落光滑圆润，呈乳白色，边缘整齐，最初是从口腔中分离得到，由于其广泛存在于人体肠道、口腔、阴道等部位的分泌液中，故被认为是人体的原籍菌。中华人民共和国卫生部于2010年将唾液乳杆菌列入允许用于食品的菌株，美国食品药品监督管理局(FDA)也将其列入安全菌种之一。

大量研究表明，唾液乳杆菌具有良好的细胞粘附能力及耐酸耐胆盐能力，同时具备调节肠道菌群、拮抗致病菌、刺激免疫反应、治疗和预防肠道炎症等多种生理功能。因此，唾液乳杆菌可作为潜在的益生菌株广泛添加于食品、药品等领域，具有巨大的应用潜力。宿主肠道是唾液乳杆菌的主要生境，若通过特异性培养基进行选择性富集，增加唾液乳杆菌在粪便样本中的丰度，即可大大提高该菌种的选育效率。因此，设计开发针对唾液乳杆菌的特异性培养基具有重要意义。

目前国内外还没有任何涉及到唾液乳杆菌特异性培养分离的相关文献报道，对唾液乳杆菌的分离还局限于针对肠道乳杆菌的普适性筛选方法(如Glu-VAN-MRS乳杆菌分离培养基)。运用该类方法筛选得到唾液乳杆菌的效率低，同时大量消耗人力物力。目前在对混菌样本中单菌的筛选，相应的特异性分离培养基逐渐出现，譬如申请号为201610827496.9、名称为“发酵乳杆菌特异性培养基及其应用”的专利申请，以及申请号为201510947745.3、名称为“植物乳杆菌特异性培养基及其应用”的专利申请，这两个发明分别公开了对发酵乳杆菌及植物乳杆菌的定性检测方法，主要通过对普通培养基的改造，实现对目标菌株的特异性培养筛选，具有简便、针对性好、效率高等特点。但针对唾液乳杆菌，并没有出现类似的特异性培养基，大大阻碍了该类益生菌的选育和开发。因此，本发明研究以肠道唾液乳杆菌为目标菌株，通过对普适性培养基的改良，达到对唾液乳杆菌的特异性分离培养，进而提高唾液乳杆菌的得率。

发明内容

本发明要解决的第一技术问题，是提供一种唾液乳杆菌特异性培养基，通过对碳源、抗生素的优化，使该培养基能够特异性培养唾液乳杆菌并对其进行活菌计数。在此基础上还提供了上述唾液乳杆菌特异性培养基的一种应用，主要是在粪便样本等含有一系列乳杆菌的样品中通过富集提高唾液乳杆菌在样本中的丰度，从而高效的筛选分离出唾液乳杆菌，操作方法简单，选择性较好，成本低廉。

本发明主要采取的技术方案是：

本发明的第一个目的提供了一种唾液乳杆菌特异性筛选培养基，所述培养基中含有唯一碳源及万古霉素、链霉素等物质。

在本发明的一种实施方式中，所述唯一碳源为鼠李糖。

在本发明的一种实施方式中，所述培养基为液体培养基或固体培养基。