[发明专利]一种检测抗稻瘟病复等位基因Pi-2/gm/zt的通用分子标记及应用在审
| 申请号： | 201810389970.3 | 申请日： | 2018-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN108300802A | 公开（公告）日： | 2018-07-20 |
| 发明（设计）人： | 邹国兴;黄永萍;陈春莲;杨平;尹建华;彭志勤;吴延寿;熊运华 | 申请（专利权）人： | 江西省农业科学院水稻研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 夏艳 |
| 地址： | 330200 江西*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种检测 复等位基因 分子标记 抗稻瘟病 水稻样品 多态性 抗稻瘟病基因 抗稻瘟病水稻 引物对序列 基因组DNA 辅助选择 供体亲本 抗性基因 受体亲本 基因 通用 检测 引物 应用 新品种 改良 | ||
1.一种检测抗稻瘟病复等位基因Pi-2/gm/zt的通用分子标记的引物对，其特征在于，该引物对为：
F:5’-GCAGGGTAACTCCTATTT-3’，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；
R:5’-AATCAGACCTTACATCACAG-3’，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种检测抗稻瘟病复等位基因Pi-2/gm/zt的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)提取待检测水稻样品基因组DNA；
2)利用权利要求1所述的引物对进行PCR扩增；
3)检测抗性基因供体亲本和需要改良材受体亲本是否存在多态性，如果存在多态性，则利用下述条件进行判断：
如果PCR扩增产物出现单独的480bp或者同时出现480bp和269bp时，则待检测水稻样品含有抗稻瘟病基因Pi-2或Pi-gm或Pi-zt基因；否则，则待检测水稻样品不含抗稻瘟病基因Pi-2或Pi-gm或Pi-zt基因。
3.根据权利要求2所述的检测抗稻瘟病复等位基因Pi-2/gm/zt的方法，其特征在于，步骤2中的PCR扩增的PCR反应体系为：10xPCR反应缓冲液2ul，5pM引物F和R各1ul，10mMdNTP0.5ul，DNA样2ul，TaqDNA聚合酶0.2ul，加ddH2O补足至20ul。
4.根据权利要求2所述的检测抗稻瘟病复等位基因Pi-2/gm/zt的方法，其特征在于，步骤2中的PCR扩增的PCR反应条件为：95℃预变性5分钟，95℃变性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸1分钟，共35个循环，72℃保温10分钟，10℃下放置。
5.权利要求2-4任一权利要求所述的方法在水稻抗稻瘟病分子育种中的应用。
6.含有权利要求1所述引物对的试剂盒。
7.权利要求6所述的试剂盒在水稻抗稻瘟病分子育种中的应用。
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