[发明专利]一种猪瘟活疫苗复方制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种猪瘟活疫苗复方制剂及其制备方法，该复方制剂由猪瘟脾淋苗、猪瘟ST细胞苗、猪瘟牛睾丸细胞苗、水解乳蛋白、脱脂奶粉、蔗糖、水解明胶、谷氨酸钠、甘露醇、海藻糖和注射用水按比例混合后，冻干制得。本发明所得复方制剂不仅可以将猪瘟脾淋苗和猪瘟细胞苗的优点合二为一，充分诱导细胞免疫和体液免疫，突破母源抗体阻碍，并可以在2‑8℃下保存长达36个月，且其对猪只的保护率效果好，适于大规模生产、应用。

技术领域

本发明属于动物用病毒疫苗制备领域，具体涉及一种猪瘟活疫苗复方制剂及其制备方法。

背景技术

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪类传染病，其伴有高接触性和高致死性的特点。不同年龄、性别和品种的猪均会感染该病，被我国列为一类动物传染病。猪瘟病毒是黄病毒科瘟病毒属的成员，为有囊膜的正链RNA病毒。

猪瘟的临床症状主要表现为一下四种：

（1）急性猪瘟。精神沉郁，腹泻，粪便呈水样或糊状并且伴有血丝和恶臭，体温升高至40-42℃，口腔黏膜、唇齿伴有溃疡出血。常继发感染，多伴肺炎和肠炎。

（2）非典型性猪瘟。临床症状不典型，发病率和死亡率显著降低。病程较长，新生感染死亡率较高。

（3）慢性猪瘟。病猪往往消瘦，贫血，体温升高不明显，食欲时好时坏，腹泻和便秘交替发生。

（4）迟发型猪瘟。先天感染的后遗症。被感染的猪出生后在一段时间内未表现症状，几个月后表现出呕吐、厌食、结膜炎等症状。怀孕母猪感染后可导致死胎、木乃伊胎。

不论哪一种都会给猪带来不同程度的影响，甚至造成死亡，给养殖户和国家造成严重的经济损失。据统计在我国每年死亡的猪只中有大约有8%的、猪死于猪瘟的。

通过给猪只接种疫苗是目前对抗猪瘟病毒最有效的防御措施之一，目前市面上预防猪瘟的疫苗主要有2种：猪瘟细胞苗，猪瘟脾淋苗。但在目前生产实践中，存在以下问题：（1）猪瘟细胞苗体液免疫较好，细胞免疫较弱，导致猪只在注射疫苗后免疫空白期较长，突破母源抗体能力较弱；（2）猪瘟脾淋苗细胞免疫原性好，可以较好的诱导细胞免疫，但产毒滴度较低，体液免疫较弱，注射后抗体效价偏低。（3）保存时间较短。

发明内容

本发明的目的在于提供一种猪瘟活疫苗复方制剂及其制备方法，其解决了传统猪瘟疫苗免疫后空白期长，体液免疫较弱，抗体效价偏低和母源抗体干扰等问题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种猪瘟活疫苗复方制剂，每升该复方制剂中含猪瘟脾淋苗50g~100g，猪瘟ST细胞苗50ml~120ml，猪瘟牛睾丸细胞苗60ml~150ml，水解乳蛋白5g~10g，脱脂奶粉10g~50g，蔗糖10g~30g，水解明胶2g~10g，谷氨酸钠1g~5g，甘露醇5g~20g，海藻糖5g~20g。

所述猪瘟活疫苗复方制剂的制备方法的具体步骤如下：

（1）按比例称取水解明胶、脱脂奶粉，溶于少量注射用水中，灭菌后备用；

（2）按比例称取水解乳蛋白、蔗糖、甘露醇、谷氨酸钠和海藻糖，溶于少量注射用水中，灭菌后备用；

（3）在无菌条件下，将猪瘟脾淋苗、猪瘟ST细胞苗、猪瘟牛睾丸细胞苗按比例混合；

（4）将步骤（1）（2）（3）制得的料液混合，加注射用水至足量后，于0℃~4℃的冻干箱中，以1℃~3℃/min的速率降温至-30℃~-40℃，维持3~5h，然后将箱内抽真空至0.01mbar，再在16~24h内升温至-8℃~-4℃，然后以5℃~8℃/h的速率升温至18℃~23℃，维持3~6h即得。

本发明的有益效果在于：