[发明专利]制备醋酸泼尼松的方法

说明书

本发明公开了一种制备醋酸泼尼松的方法，首先使用简单节杆菌CPCC 140451将醋酸可的松1,2位脱氢，转化生成醋酸泼尼松，然后使用混合溶剂进行精制，具有工艺简单，精制效率高，溶剂简单易得，可回收套用，毒性小等优点，可用于大规模工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种化学品的制备方法，尤其涉及一种制备醋酸泼尼松的方法。

背景技术

醋酸泼尼松(Prednisone Acetate，17α，21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，11，20-三酮-21醋酸酯，CAS：125-10-0)，为白色或几乎白色结晶性粉末，无臭，味苦；在氯仿中易溶，在丙酮中略溶，在乙醇或醋酸乙酯中微溶，在水中不溶，比旋度为+183°～+190°。其化学结构式如下所示：

醋酸泼尼松为肾上腺皮质激素类药物，具有影响糖代谢、抗炎、抗过敏、抗毒、抗恶性淋巴组织疾病等作用。用于肾上腺皮质功能减退，严重支气管哮喘，皮炎等过敏性疾病等。

中国专利CN101760495B报道了以节杆菌AS 1.94为转化菌种，将醋酸可的松转化成醋酸泼尼松，但转化率较低，仅有77.3％；虽然文献Applied Microbiology andBiotechnology(2015),99(1),387-397报道以Arthrobacter simplex CPCC 140451为菌种转化醋酸可的松成醋酸泼尼松，但其主要研究羟丙基-β-环糊精对转化的作用，尚未研究醋酸泼尼松转化过程产生的杂质1泼尼松和杂质2可的松的大小；中国专利CN 106893754 A报道了以节杆菌AS 1.754为转化菌种，转化过程产生了8.2％的泼尼松杂质1；

醋酸可的松经简单节杆菌转化成醋酸泼尼松后，由于二者极性和分子量相差很小，导致根据极性分离的硅胶柱和根据分子量分离的凝胶柱分离方法不能用于该产品上，因此，目前对二者的精制仍然是一个难题，德国专利DE 1252677报道了使用二氯乙烷结晶的精制工艺，但该工艺不仅收率低，只有75％，而且使用了一类溶剂二氯乙烷，给环境和人员健康造成威胁。

发明内容

本发明的目的是为解决目前醋酸泼尼松制备方法的上述技术问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种制备醋酸泼尼松的方法，采用简单节杆菌为转化菌株，将微粉化醋酸可的松转化成醋酸泼尼松；

所述微粉化醋酸可的松的粒径D90≤100μm。

进一步地，所述微粉化醋酸可的松的投料浓度为5％-8％。

进一步地，所述简单节杆菌的斜面培养基采用的配比为：葡萄糖1.1％，酵母膏1.2％，琼脂2.0％，pH7.0-7.5，余量为自来水；

一级种子和发酵转化用培养基采用的配比为：葡萄糖1.05％，玉米浆0.6％，蛋白胨0.8％，KH₂PO₄ 0.4％，pH7.2-7.5，菌体培养温度为28-32℃，投料后转化温度为31-34℃，转化时间为24-48h。

进一步地，转化结束后将发酵液灭活，离心后弃上清，固体部分采用丙酮提取，得到醋酸泼尼松粗品，将醋酸泼尼松粗品回流溶解于A溶剂，然后缓慢加入B溶剂减压浓缩，浓缩至母液体积为0.5-5倍投入粗品料量体积时(v/w)，降温结晶离心后得到醋酸泼尼松精品；

其中，所述溶剂A选自甲醇、乙腈、DMF、四氢呋喃、吡啶、氯仿和二氯甲烷中的一种，加入量为醋酸泼尼松粗品重量的15-20倍；

所述溶剂B选自乙酸乙酯、石油醚、甲苯、二甲苯、甲基异丁酮、乙醇、丙酮和环己烷中的一种，加入量为醋酸泼尼松粗品重量的1-3倍。