[发明专利]一种细胞外泌物质采样与原位检测方法及装置

说明书

本发明提供了一种细胞外泌物质采样与原位检测方法与装置，包括向所述微流体探针内注入有机溶剂，利用有机溶剂萃取待测细胞的待测部位的外泌物质得到待测样品并送入检测装置。所述微流体探针包括用于接收并流通所述有机溶剂并采样的毛细管，毛细管具有一U型结构，U型结构的顶端开有取样口，将U型结构顶端移动到待测细胞的待测部位，流通在所述毛细管内的有机溶剂通过取样口萃取待测细胞的待测部位的外泌物质，进而得到待测样品。本发明的方法和装置能在保持细胞处于原始状态的情况下对细胞外泌物进行采样及原位检测，实现亚细胞水平的细胞外泌物分析。

技术领域

本发明属于细胞研究技术领域，涉及一种细胞外泌物质采样与原位检测方法及装置，尤其涉及一种基于微流体技术的细胞外泌物质采样与原位检测方法及装置。

背景技术

作为绝大部分生命体最基本的结构和功能单元，细胞的行为将直接影响生命体的性质，因而细胞成为了经久不衰的研究热点。细胞会通过胞吞胞吐等方式实现与外界的物质交换，而这种交换物质的行为能够反映细胞的状态，比如人们可以通过外泌体来检测癌细胞的存在，这对于癌症的早期诊断有着很大的参考价值。近年来，人们对于细胞的研究已经进展到了单细胞水平，但即使是对于单个细胞，它的不同部位也会有一定的差异性，因而亚细胞水平的研究逐渐引起了科研工作者的关注。

对于细胞的研究手段多种多样，如光学成像，荧光分析，电泳分析，色谱及质谱分析等。其中质谱检测技术因其分析速度快、普适性强、分辨率高等优点，而广泛用于细胞分析。目前的细胞质谱分析也已经发展到了单细胞水平，可以对单个细胞内的成分进行分析，其中的膜片钳技术已经实现了对于细胞部分内容物的分析。然而这种分析一旦进行这种质谱分析，就势必会对细胞造成严重影响，而对于细胞状态分析不一定只能通过对于其内容物的分析来实现。因此发展一种在细胞正常生存状态下进行亚细胞水平的外泌物的分析技术就至关重要。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的技术问题，提供一种微流体技术的细胞外泌物质采样与原位检测方法及装置，本发明的方法和装置能在保持细胞处于原始状态的情况下对细胞外泌物进行采样及原位检测，实现亚细胞水平的细胞外泌物分析。

为达到本发明的目的，本发明一方面提供了一种细胞外泌物质采样与原位检测方法，包括：

在细胞培养装置中对待测细胞进行培养；

将微流体探针移动到待测细胞的待测部位；

向所述微流体探针内注入有机溶剂，利用有机溶剂萃取待测细胞的待测部位的外泌物质得到待测样品，并送入检测装置。

根据本发明的一些实施方式，所述微流体探针包括：

用于接收并流通所述有机溶剂并采样的毛细管；

与所述毛细管的一端连接的锥形末端，用于将所述待测样品送入检测装置；

用于固定所述毛细管和锥形末端的固定环。

根据本发明的优选实施例，所述毛细管具有一U型结构，所述U型结构的顶端开有取样口。

根据本发明的一些实施例，所述毛细管的一端连接有机溶剂源，另一端连接所述锥形末端。

在一些具体的实施方式中，将所述毛细管的U型结构顶端移动到待测细胞的待测部位，通过有机溶剂源将有机溶剂注入到毛细管中并使其流通，由于有机溶剂在取样口由于表面张力的限制不会通过取样口泄露至外部，有机溶剂通过开在U型结构顶端的取样口萃取待测细胞的待测部位的外泌物质，进而得到含有待测细胞的待测部位的外泌物质的待测样品。

根据本发明的优选实施例，所述有机溶剂包括烃类化合物、羟基类化合物、含氮化合物和含氧化合物中的一种或多种，优选包括甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、乙腈、丙酮、甲烷、乙烷、丙烷、丁烷、戊烷和己烷中的一种或多种。