[发明专利]十倍体长穂偃麦草蓝粒性状专化分子标记和荧光原位杂交探针的开发及应用有效
申请号: | 201810399771.0 | 申请日: | 2018-04-28 |
公开(公告)号: | CN108396026B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 郑琪;刘利勤;张静;罗巧玲;李宏伟;李滨;李振声 | 申请(专利权)人: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/6841 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;陈晓庆 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 十倍 体长 麦草 性状 化分 标记 荧光 原位杂交 探针 开发 应用 | ||
1.长穗偃麦草4Ag染色体分子标记,是以长穗偃麦草的基因组DNA为模板,采用引物对M进行扩增得到的DNA分子:
所述引物对M由序列1所示的单链DNA分子和序列2所示的单链DNA分子组成。
2.用于检测或辅助检测长穗偃麦草4Ag染色体的探针,为序列3所示的DNA分子。
3.根据权利要求2所述的探针,其特征在于:所述探针标记有荧光基团。
4.用于检测或辅助检测长穗偃麦草4Ag染色体的引物对,为权利要求1中所述的引物对M。
5.用于检测或辅助检测长穗偃麦草4Ag染色体的PCR试剂,包括权利要求4所述的引物对。
6.用于检测或辅助检测长穗偃麦草4Ag染色体的试剂盒,包括权利要求4所述的引物对或权利要求5所述的PCR试剂。
7.权利要求1所述的分子标记或权利要求2或3所述的探针或权利要求4所述的引物对或权利要求5所述的PCR试剂或权利要求6所述的试剂盒在如下1)-12)中任一种中的应用:
1)检测或辅助检测长穗偃麦草4Ag染色体;
2)制备检测或辅助检测长穗偃麦草4Ag染色体的产品;
3)检测或辅助检测待测小麦中是否含有长穗偃麦草4Ag染色体;
4)制备检测或辅助检测待测小麦中是否含有长穗偃麦草4Ag染色体的产品;
5)检测或辅助检测待测小麦是否为蓝粒小麦;
6)制备检测或辅助检测待测小麦是否为蓝粒小麦的产品;
7)检测或辅助检测待测小麦是否含有长穂偃麦草基因组;
8)制备检测或辅助检测待测小麦是否含有长穂偃麦草基因组的产品;
9)分子标记辅助选择育种;
10)制备分子标记辅助选择育种的产品;
11)小麦分子育种;
12)制备小麦分子育种的产品。
8.一种检测或辅助检测待测小麦中是否含有长穗偃麦草4Ag染色体的方法,为如下(a1)或(a2):
(a1)包括如下步骤:用权利要求2或3所述的探针对待测小麦进行原位杂交,若出现点状的杂交信号,则表示待测小麦中含有或候选含有长穗偃麦草4Ag染色体;若未出现点状的杂交信号,则表示待测小麦中不含有或候选不含有长穗偃麦草4Ag染色体;所述原位杂交不含有封阻的步骤;
(a2)包括如下步骤:用权利要求4所述的引物对对待测小麦进行PCR扩增,若扩增得到大小为329bp的条带,则表示待测小麦中含有或候选含有长穗偃麦草4Ag染色体;若未扩增得到大小为329bp的条带,则表示待测小麦中不含有或候选不含有长穗偃麦草4Ag染色体。
9.一种检测或辅助检测待测小麦是否为蓝粒小麦的方法,为如下(b1)或(b2):
(b1)用权利要求2或3所述的探针对待测小麦进行原位杂交,若出现点状的杂交信号,则表示待测小麦为或候选为蓝粒小麦;若未出现点状的杂交信号,则表示待测小麦不为或候选不为蓝粒小麦;所述原位杂交不含有封阻的步骤;
(b2)用权利要求4所述的引物对对待测小麦进行PCR扩增,若扩增得到大小为329bp的条带,则表示待测小麦为或候选为蓝粒小麦;若未扩增得到大小为329bp的条带,则表示待测小麦不为或候选不为蓝粒小麦。
10.一种检测或辅助检测待测小麦中是否含有长穗偃麦草基因组的方法,为如下(c1)或(c2):
(c1)包括如下步骤:用权利要求2或3所述的探针对待测小麦进行原位杂交,若出现点状的杂交信号,则表示待测小麦中含有或候选含有长穗偃麦草基因组;若未出现点状的杂交信号,则表示待测小麦中不含有或候选不含有长穗偃麦草基因组;所述原位杂交不含有封阻的步骤;
(c2)包括如下步骤:用权利要求4所述的引物对对待测小麦进行PCR扩增,若扩增得到大小为329bp的条带,则表示待测小麦中含有或候选含有长穗偃麦草基因组;若未扩增得到大小为329bp的条带,则表示待测小麦中不含有或候选不含有长穗偃麦草基因组。
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