[发明专利]β-呋喃果糖苷酶突变体及其应用有效

申请号：	201810405006.5	申请日：	2018-04-28
公开（公告）号：	CN108588058B	公开（公告）日：	2020-04-21
发明（设计）人：	何冰芳;余棋;储建林;吴斌;姜天玥	申请（专利权）人：	南京工业大学
主分类号：	C12N9/26	分类号：	C12N9/26;C12N15/56;C12P19/00;C12P19/14
代理公司：	江苏致邦律师事务所 32230	代理人：	徐蓓;尹妍
地址：	211816 江***	国省代码：	江苏;32
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摘要：
搜索关键词：	呋喃果糖突变体及其应用
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【权利要求书】：

1.一种β-呋喃果糖苷酶突变体，其特征在于，所述突变体是通过用另一种氨基酸残基取代SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的下述位点的氨基酸残基而获得的β-呋喃果糖苷酶突变体，所述的氨基酸残基位置为SEQ ID NO：1所示氨基酸序列中的：第218位，和/或第408位，和/或第410位；第218位所述的另一种氨基酸残基为丙氨酸；第408位所述的另一种氨基酸残基选自下述的氨基酸：丙氨酸或缬氨酸；第410位所述的另一种氨基酸残基选自下述的氨基酸：丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、赖氨酸、脯氨酸或精氨酸。

2.根据权利要求1所述的β-呋喃果糖苷酶突变体，其特征在于第408位所述的另一种氨基酸残基为丙氨酸。

3.根据权利要求1所述的β-呋喃果糖苷酶突变体，其特征在于第410位所述的另一种氨基酸残基为丙氨酸。

4.编码权利要求1-3任一项所述的β-呋喃果糖苷酶突变体的基因。

5.包含权利要求4所述基因的重组载体。

6.包含权利要求5所述重组载体的转化体。

7.权利要求1-3任一项所述的β-呋喃果糖苷酶突变体在以蔗糖为底物合成β-2，6型低聚果糖中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述以蔗糖为底物合成β-2，6型低聚果糖的反应体系中pH值为 6-8.5。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述以蔗糖为底物合成β-2，6型低聚果糖的反应体系中pH 值为8。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述底物蔗糖浓度为1-2.5M；所述β-呋喃果糖苷酶突变体的用量为2-6U/g蔗糖。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于：所述底物蔗糖浓度为1.5M；所述β-呋喃果糖苷酶突变体的用量为2-3U/g蔗糖。

12.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述合成β-2，6新型低聚果糖的反应温度为25-40℃；酶法合成时间为12-72h。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于：所述合成β-2，6新型低聚果糖的反应温度为25-30℃。