[发明专利]辅助性表位肽及其应用

说明书

本发明涉及辅助性表位肽及其应用。该辅助性表位肽是通过将序列SEQ ID NO:1中的一个或两个氨基酸残基替换为4‑硝基苯丙氨酸得到的。该辅助性表位肽可用于增强抗原或抗原表位的免疫原性，或用于制备或构建疫苗。本发明的辅助性表位肽能通用性地增强现有抗原或抗原表位的免疫原性，提高特异性抗体的滴度，具有潜在的辅助激活CTL效应的能力。

技术领域

本发明涉及一种辅助性表位肽及其应用，属于生物医药技术领域。

背景技术

肿瘤疫苗是一种最有效、最经济的癌症治疗方案，有限次数的疫苗注射即可带来长期的抗肿瘤免疫反应。而在临床应用中，肿瘤疫苗的治疗效果一直不太理想，其原因除了肿瘤自身抗原性较低以外，机体对于肿瘤抗原的免疫耐受可能也是重要的因素。最新的研究表明，免疫耐受主要是因为体内抗原特异性的CD4⁺T细胞被消除了，而和CD8⁺T细胞或者B细胞是否被消除没有太大关系。因此，招募不依赖自身抗原的CD4⁺T细胞，打破CD4⁺T细胞的免疫耐受状态，可能是激发肿瘤疫苗治疗潜力的关键步骤。

CD4⁺T细胞是人体内免疫反应的开关，能调节免疫反应的强弱。一方面，耐受机制能减弱针对自身抗原的免疫反应，从而维持体内稳态；另一方面，打破耐受能带来针对自身抗原的强烈免疫反应，但与此同时也有诱发自身免疫性疾病的风险。所以，为了使治疗达到最好的效果，我们应该在最小化自身免疫疾病损害的基础上，尽量打破免疫耐受，从而使肿瘤的免疫治疗效果最大化。

PG·Schultz等人发现，在部分天然的蛋白质中部分位点引入非天然氨基酸可以形成新的MHC-Ⅱ分子限制的CD4表位，提高其免疫原性。同时，因为新的表位完全是外源性的，所以不会引发自身免疫疾病。然而，并不是所有的天然蛋白质或天然多肽引入任意非天然氨基酸，都能提高免疫原性，这就需要研究者来进行针对性研究。本发明的发明人所在课题组以辅助性T表位肽PADRE为研究对象进行了大量研究，以期获得通用性的辅助性表位肽。

经检索发现，专利号CN201110303946.1、授权公告号CN102370979B的中国发明专利，公开了一种针对人TNF-α分子的自体疫苗的构建方法，其中用到了PADRE氨基酸序列AKFVAAWTLKA。

申请号CN201611207485.7、申请公布号CN106749674A的中国发明专利申请，公开了新型哮喘多肽疫苗及其制备方法，涉及含有PADRE多肽aK-Cha-VAaWTLKAa的融合多肽，其中a表示D-丙氨酸，Cha表示L-环己基丙氨酸。

然而，以上述技术方案为代表的现有技术中尚不存在以PADRE多肽为基础进行改造获得的通用性辅助性表位肽。

发明内容

本发明的主要目的是：克服现有技术存在的问题，提供一种辅助性表位肽，具有通用性，能增强抗原或抗原表位的免疫原性；此外，还提供涉及该辅助性表位肽的用途。

为实现上述主要目的，本发明的技术方案如下：

一种辅助性表位肽，其特征是，该辅助性表位肽是通过将序列SEQ ID NO:1中的一个或两个氨基酸残基替换为4-硝基苯丙氨酸得到的。

优选地，该辅助性表位肽的序列为SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:20之一。

本发明还提供：

前文所述辅助性表位肽的用途，所述用途为用于增强抗原或抗原表位的免疫原性，所述抗原或抗原表位含有氨基酸残基；或者，所述用途为用于制备或构建疫苗。

含有前文所述辅助性表位肽的产品，所述产品为药物、药物组合物、生物芯片、疫苗、或疫苗组合物。所述疫苗或疫苗组合物包括肿瘤疫苗或疫苗组合物。

本发明还提供：