[发明专利]T细胞培养基及培养方法

说明书

本发明提供一种T细胞培养基，其包含无血清培养基，包括麸酰胺酸；介白素‑2，浓度为10‑6000IU/mL；碱性纤维母细胞生长因子，浓度为1‑300pg/mL；转化生长因子‑α，浓度为1‑3000pg/mL；以及趋化因子配体5，浓度为50‑1500pg/mL。并且，本发明提供一种T细胞培养方法，其包含下列步骤：(a)从血液中取得T细胞；以及；(b)将T细胞培养于如前所述的T细胞培养基中。借由如上所述的T细胞培养基及培养方法，可以提高T细胞的增殖率，同时可以提高具有增殖活性T细胞以及免疫功能活化T细胞的比例并减少T细胞发生细胞凋亡的状况。

技术领域

本发明关于一种T细胞培养基及培养方法，尤其是一种能提高T细胞的增殖率，同时可以提高具由增殖活性T细胞以及免疫功能活化T细胞的比例并减少T细胞发生细胞凋亡的状况的T细胞培养基及培养方法。

背景技术

T细胞为淋巴细胞的一种，其来自于人体骨髓的造血干细胞(Hematopoietic stemcells,HSC)，T细胞由胸腺迁移到胸腺内而分化成熟，T细胞在胸腺内分化成熟后进一步移居到淋巴组织中。T细胞还可进一步分为毒杀型T细胞(Cytotoxic T cell)及辅助型T细胞(Helper T cell)、调节型T细胞(Regulatory T cell)以及记忆型T细胞(Memory T cell)，各类T细胞皆在人体免疫反应中扮演重要角色。因此，近年来T细胞常被用于进行有关于免疫系统的实验研究或是相关范畴的应用，然而，当要以T细胞进行实验研究或是将T细胞应用于其他范畴时，都需要增殖出足够的T细胞，如何有效提高T细胞的增殖率，即为一项有待解决的问题。

发明内容

本发明的目的即针对上述问题，提供一种T细胞培养基，其包含无血清培养基，包括麸酰胺酸；介白素-2，浓度为10-6000IU/mL；碱性纤维母细胞生长因子，浓度为1-300pg/mL；转化生长因子-α，浓度为1-3000pg/mL；以及趋化因子配体5，浓度为50-1500pg/mL。

如上所述的T细胞培养基，所述碱性纤维母细胞生长因子的浓度为40pg/mL。

如上所述的T细胞培养基，所述转化生长因子-α的浓度为400pg/mL。

如上所述的T细胞培养基，所述趋化因子配体5的浓度为1000pg/mL。

如上所述的T细胞培养基，还包含抗-CD3抗体，其浓度为10-100ng/mL。

如上所述的T细胞培养基，还包含唑来膦酸，其浓度为1μM-20μM。

如上所述的T细胞培养基，还包含半乳糖苷基神经酰胺，其浓度为20-200ng/mL。

为达上述目的及其他目的，本发明提供一种T细胞培养方法，其包含下列步骤：(a)从血液中取得T细胞；以及；(b)将T细胞培养于如上所述的T细胞培养基中。

如上所述的方法，在步骤(a)中，从血液中分离出外周血液单核细胞，并将外周血液单核细胞培养于促T细胞增殖培养基中，使外周血液单核细胞中的T细胞增殖，所述促T细胞增殖培养基为无血清培养基并包括麸酰胺酸以及介白素-2。

借由如上所述的T细胞培养基及培养方法，可以提高T细胞的增殖率，同时可以提高具增殖活性T细胞以及免疫功能活化T细胞的比例并减少T细胞发生细胞凋亡的状况。

附图说明

图1为本发明实施例1的T细胞增殖培养实验的实验结果图；

图2为本发明实施例1的具有增殖活性T细胞比例分析中对照组样本的前方散射光(forward scatter,FSC)/侧方散射光(side scatter,SSC)散点图；

图3为本发明实施例1的具有增殖活性T细胞比例分析中实验组样本的FSC/SSC散点图；