[发明专利]一种香果树种苗的繁殖方法

说明书

本发明公开了一种香果树种苗的繁殖方法。即以香果树茎尖为外植体，消毒后接种于特定的丛生芽诱导培养基中诱导形成丛生芽；将外植体上形成的丛生芽分成单芽，转入特定的增殖培养基中进行增殖继代培养；将增殖继代培养得到的丛生芽分成单个的芽苗，再将芽苗转到特定的生根培养基中促使其生根，得到香果树试管苗，然后将香果树试管苗经炼苗培养，得到香果树种苗。本发明的香果树种苗的繁殖方法，具有繁殖速度快、成活率高等特点，可用于香果树种苗的规模化生产。

技术领域

本发明涉及一种香果树种苗的繁殖方法，属于植物组织培养技术领域。

背景技术

香果树系茜草科香果树属的高大落叶乔木，起源于距今约1亿年的中生代白垩纪，是第四纪冰川孑遗植物，中国特有单种属稀有树种，在茜草科植物系统发育、形态演化及中国植物地理区系研究以及观赏、药用、材用等方面都极具价值。

在自然状态下，香果树有典型的间歇性结实特性，2-4年开花结果一次；种子有休眠特性，种子细小、生活力低下、寿命仅有1年，自然萌发率极低，种群呈衰退趋势，濒临灭绝，已被列为国家二级保护植物。利用茎尖培养的方法开展野生香果树种苗繁育技术的研究，对于克服香果树种子繁殖中存在的困难，挽救珍稀濒危野生香果树种质资源，实现香果树种质资源的可持续利用具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是为了克服香果树种子繁殖中存在的困难，提供一种香果树种苗的繁殖方法，该繁殖方法具有繁殖速度快、成活率高等的特点，可用于香果树种苗的规模化生产。

本发明的技术方案

一种香果树种苗的繁殖方法，即以香果树的茎尖为外植体，先后分别在丛生芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基中进行培养，得到的香果树试管苗经炼苗培养，即得香果树种苗，其繁殖过程具体包括如下步骤：

(1)、外植体的消毒

以香果树顶芽或侧芽作为外植体，依次用酒精、次氯酸钠消毒,然后用无菌水洗净，得到消毒后的外植体；

(2)、诱导培养形成丛生芽

将步骤(1)所得的消毒后的外植体在无菌条件下，剥取茎尖，接种在丛生芽诱导培养基上，控制温度为25±2℃培养25天后，外植体上形成丛生芽；

所述的丛生芽诱导培养基，按每升计算，由495mg K₂SO₄、185mg MgSO₄·7H₂O、85mgKH₂PO4、200mg NH₄NO₃、11.25mg MnSO₄·4H₂O、4.3mg ZnSO₄·7H₂O、3.1mgH₃BO₃、0.125mgCuSO₄·5H₂O、0.125mg Na₂MoO₄·2H₂O、278mgCa(NO₃)₂·4H₂O、13.9mgFeSO₄·7H₂O、18.65mg Na₂-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B₁、0.25mg维生素B₅、0.25mg维生素B₆、1mg或2mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；

(3)、增殖继代培养

将步骤(2)外植体上形成的丛生芽分成单芽，每个单芽逐一转入增殖培养基，控制温度为25±2℃进行增殖继代培养35天，每个单芽上都形成了丛生芽；