[发明专利]钙吸收相关基因VDR基因多态性检测试剂盒在审
| 申请号： | 201810409448.7 | 申请日： | 2018-05-02 |
| 公开（公告）号： | CN108342460A | 公开（公告）日： | 2018-07-31 |
| 发明（设计）人： | 田晓丽 | 申请（专利权）人： | 上海美丽人生医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 刘燕武 |
| 地址： | 200231 上海市浦东新区中国*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测引物 内控 引物 多态性检测 基因检测 相关基因 钙吸收 试剂盒 特异性强 试管 突变 耗时 样本 检测 | ||
1.一种钙吸收相关基因VDR基因多态性检测的引物组合物，其特征在于，包括G238A检测引物和内控基因检测引物，其中，
所述G238A检测引物的序列如下：
G238A检测引物一：5′-GGCCACAGAC AGGCCTGAG-3′；
G238A检测引物二：5′-CCACAGACAG GCCTGTA-3′；
G238A检测引物三：5′-TAGGCAGAAC CATCTCTCA-3′；
所述内控基因检测引物的序列如下：
内控引物一：5’-AGCAAGCAGG AGTATGACG-3'；
内控引物二：5'-GAAAGGGTGT AACGCAACT-3'。
2.一种钙吸收相关基因VDR基因多态性检测试剂盒，其特征在于，包括装有G238A检测引物和内控基因检测引物的试管，其中，
所述G238A检测引物的序列如下：
G238A检测引物一：5′-GGCCACAGAC AGGCCTGAG-3′；
G238A检测引物二：5′-CCACAGACAG GCCTGTA-3′；
G238A检测引物三：5′-TAGGCAGAAC CATCTCTCA-3′；
所述内控基因检测引物的序列如下：
内控引物一：5’-AGCAAGCAGG AGTATGACG-3'；
内控引物二：5'-GAAAGGGTGT AACGCAACT-3'。
3.根据权利要求2所述的一种钙吸收相关基因VDR基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还包括分别采用试管装填的蒸馏水、PCR反应预混液、阳性质控VDR基因G238A突变质粒和阳性质控VDR基因G238A野生质粒。
4.根据权利要求3所述的一种钙吸收相关基因VDR基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述的阳性质控VDR基因G238A突变质粒通过以下方法获得：
采用PCR技术，获取VDR基因G238A位点的突变型片段，然后，将突变型片段与pEASY-Blunt Cloning Kit载体连接，转化，再转入大肠杆菌感受态细胞培养，最后，提取质粒，即得到。
5.根据权利要求3所述的一种钙吸收相关基因VDR基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述的阳性质控VDR基因G238A野生质粒通过以下方法获得：
采用PCR技术，获取VDR基因G238A位点的野生型片段，然后，将野生型片段与pEASY-Blunt Cloning Kit载体连接，转化，再转入大肠杆菌感受态细胞培养，最后，提取质粒，即得到。
6.根据权利要求3所述的一种钙吸收相关基因VDR基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒采用挡板分隔为两个独立腔体，每个腔体中安装有海绵，在海绵上还加工有用于放置试管的容器孔，所述试剂盒的两个腔体中，其中一个腔体中放置装有蒸馏水与PCR反应预混液的试管，另一个腔体中放置装有各阳性质控质粒、G238A检测引物和内控基因检测引物的试管。
7.根据权利要求6所述的一种钙吸收相关基因VDR基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述的容器孔在试剂盒内平行排列布置。
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