[发明专利]一种高产纤维素酶的密丝明孢曲霉及其发酵方法与应用在审
申请号: | 201810415546.1 | 申请日: | 2018-05-03 |
公开(公告)号: | CN108410742A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 刘洋;邱忠平;孟涛;龚正君;王冬梅;樊超;李明星;汤国雄 | 申请(专利权)人: | 西南交通大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N9/42;C12P7/10;C12P19/14;C12P19/02;C12R1/645;C12R1/865 |
代理公司: | 成都虹盛汇泉专利代理有限公司 51268 | 代理人: | 王伟 |
地址: | 610031 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纤维素酶 曲霉 发酵 生物乙醇 乙醇 纤维素酶应用 高产 滤纸酶活力 商业化应用 生产成本低 纤维素 废弃生物 获得高产 秸秆残渣 粗酶液 得率 酶解 制备 应用 保存 | ||
1.一种高产纤维素酶的密丝明孢曲霉Sartorya Vuill W-10,保存编号为CGMCCNo.11991。
2.一种采用权利要求1所述的密丝明孢曲霉发酵产纤维素酶的方法,其特征在于,步骤如下:
(1)配制培养基:按照硝酸钾4g、乳糖或葡萄糖4g、尿素0.2g、磷酸氢二钾1.5g、Mandel’s营养液2~6ml、麸皮4~12g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.3g、氢氧化钠预处理后的秸秆粉30g的比例配制得到培养基,用去离子水定容至1000mL,并利用无机酸调节培养基的pH值为2.5~3.5;
(2)接种密丝明孢曲霉种子液:按照培养基体积的8~15%,将密丝明孢曲霉种子液接种于步骤(1)制备的培养基中;
(3)制备纤维素酶:将接种密丝明孢曲霉的培养基于45~55℃、180r/m条件下发酵6~8天即得含有纤维素酶的粗酶液。
3.根据权利要求2所述采用密丝明孢曲霉发酵产纤维素酶的方法,其特征在于所述步骤(1)中,无机酸为盐酸、硝酸或硫酸。
4.根据权利要求2所述采用密丝明孢曲霉发酵产纤维素酶的方法,其特征在于所述步骤(1)中,按照40~60ml/250ml的装瓶量,将配制的培养基分装到发酵容器中。
5.权利要求2至4任一权利要求所述方法制备的纤维素酶在制备生物乙醇中的应用。
6.根据权利要求5所述纤维素酶在制备生物乙醇中的应用,其特征在于所述生物乙醇的制备过程为:以秸秆残渣作为底物,将底物、含有纤维素酶的粗酶液加入到发酵容器中得到底物浓度为40~100g/L的混合液,并利用无机酸和氢氧化钠溶液调节混合液的pH值为5~6,于30~50℃、120~180r/min条件下添加吐温-80非离子型表面活性剂、含有纤维素二糖酶的粗酶液和酿酒酵母,同步糖化发酵3~4天,即得生物乙醇。
7.根据权利要求6所述纤维素酶在制备生物乙醇中的应用,其特征在于每克底物中纤维素酶的纸滤酶活力为5~15FPU、纤维二糖酶酶活力为5~15CBU。
8.根据权利要求6所述纤维素酶在制备生物乙醇中的应用,其特征在于所述吐温-80的终浓度为1~10g/L。
9.根据权利要求6所述纤维素酶在制备生物乙醇中的应用,其特征在于所述酿酒酵母终浓度为8g/L。
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