[发明专利]试剂盒和β-葡聚糖提取物在禽类动物免疫增强中的应用

说明书

本发明涉及β‑葡聚糖提取物在禽类动物免疫增强中的应用。具体地说，本发明提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括：(1)用于禽类动物免疫增强的免疫增强剂，所述免疫增强剂包含从酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)细胞壁提取得到的β‑葡聚糖提取物；和(2)病毒疫苗。本发明还提供了从酿酒酵母细胞壁提取得到的β‑葡聚糖提取物在制备用于禽类动物免疫增强的试剂盒和免疫增强剂中的应用。本发明使用提取自酿酒酵母细胞壁的β‑葡聚糖来对禽类动物进行加强免疫，可以增强接种疫苗的禽类动物的淋巴细胞增殖反应和T细胞应答；降低病毒载量；降低致病率或死亡率；提前产生抗体；提高抗体生成量；和/或限制病毒扩散。

技术领域

本发明涉及免疫学领域，具体涉及酿酒酵母细胞壁组分β-葡聚糖在禽类中作为免疫增强剂的应用。

背景技术

现在医学的一个成功例子之一是研发出疫苗来对抗传染性病毒。但是，针对某种病原体，疫苗不一定总是能够有效地诱导免疫反应。杀灭疫苗和亚单位疫苗需要佐剂来加强它们的免疫原性。明矾(铝盐)是人类和动物中最常用的疫苗佐剂。一个世纪以来，明矾都被认为是安全的。但是，明矾的神经毒性和局部反应是个问题，特别是在皮内注射的时候。而且，明矾诱导强烈的Th2型(体液性)反应并且能够有效地对抗细胞外病原体，但是几乎没有能力诱导强烈的Th1(细胞介导的)反应，而这种Th1反应对抵抗很多细胞内病原体是非常重要的。市场上另一种强力的佐剂是弗氏佐剂，这种佐剂是一种带有或者不带有杀灭分枝杆菌(mycobacterium)油包水乳液(分别称为CFA和IFA)。完全弗氏佐剂是丰富的(abounded)，因为在注射部位诱导强烈的反应和坏死。因此，非常需要安全的、无毒的并且有效的能够诱导强烈体液免疫和细胞介导性免疫的佐剂。此外，任何准备研发的新佐剂，不管其是天然产品还是合成产品，都应该适用于新疫苗平台技术包括亚单位疫苗，并且在通过不同途径(包括口服、粘膜注射和皮内注射)接种疫苗来施用时也必须是安全的。本申请人已经研发出独特的天然产品β-1,3/1,6-葡聚糖，这种葡聚糖从酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)细胞壁提取得到，并且满足佐剂的所有这些安全标准。

β-葡聚糖颗粒具有能够与免疫细胞例如巨噬细胞和树突细胞上的受体相互作用的细胞表面受体，从而诱导强烈的免疫反应。而且，一些体外测试已经表明，β-葡聚糖能够锻炼记忆反应的免疫系统，说明它们能够用作良好的疫苗佐剂。此外，β-葡聚糖颗粒的多孔性且中空的结构能够封装疫苗，使得它们不仅是良好的佐剂，而且还是亚单位疫苗和DNA疫苗的完美的疫苗输送系统。尽管所有这些报道表明β-葡聚糖能够诱导强烈的免疫反应并加强疫苗诱导性免疫反应，但是仍然没有确凿的证据表明将β-葡聚糖在动物尤其是禽类的疫苗接种中能够用作疫苗佐剂。

因此，本发明的主要目的是检测了基于β-葡聚糖颗粒的疫苗接种方案在禽类中抵抗病毒性感染(现有疫苗在防止动物感染方面不太有效)的免疫加强潜力。β-葡聚糖可以以饲料添加剂在疫苗接种之前或者期间提供，这种方式是向畜禽尤其是禽类动物使用佐剂的最经济的途径。β-葡聚糖还可以与疫苗联合并且和疫苗一起口服或者肠胃外施用。

发明内容

为了解决现有技术的一个或者多个上述问题，本发明在第一方面提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括：(1)用于禽类动物免疫增强的免疫增强剂，所述免疫增强剂包含从酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)细胞壁提取得到的β-葡聚糖提取物；和(2)病毒疫苗。

本发明在第二方面提供了β-葡聚糖提取物在制备本发明第一方面所述的试剂盒中的应用，其中所述β-葡聚糖提取物从酿酒酵母细胞壁提取得到。

本发明第三方面提供了β-葡聚糖提取物在制备用于禽类动物免疫增强的免疫增强剂中的应用，其中所述β-葡聚糖提取物从酿酒酵母细胞壁提取得到。

本发明具有如下优点：

(1)可以增强接种疫苗动物的淋巴细胞增殖反应和T细胞应答。