[发明专利]一种利用便携式血糖仪测定污泥重金属微生物毒性的方法

权利要求书

1.一种评价污泥重金属微生物毒性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取污泥，经提取液提取后获得污泥重金属毒性液；

(2)制备微生物悬液；

(3)将LB培养基、葡萄糖溶液和污泥重金属毒性液按照一定比例混合制成培养液，然后加入微生物悬液，培养微生物，分别测定培养前和培养后培养液中的葡萄糖浓度；

(4)根据培养前后葡萄糖浓度折算出微生物生长抑制率，由此评价污泥中重金属微生物毒性大小。

2.根据权利要求1所述的一种利用微生物评价污泥重金属毒性的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，提取液为HCl。

3.根据权利要求2所述的一种评价污泥重金属微生物毒性的方法，其特征在于，所述步骤(1)中污泥重金属毒性液的提取条件为：室温下，取适量干污泥于离心管中，加入0.1mol/L HCl，经振荡器振荡再静置后过滤得污泥重金属毒性液。

4.根据权利要求1所述的一种评价污泥重金属微生物毒性的方法，其特征在于，所述微生物为大肠杆菌。

5.根据权利要求1所述的一种评价污泥重金属微生物毒性的方法，其特征在于，所述步骤(4)中步骤(4)中，微生物悬液：LB培养基：葡萄糖溶液：重金属毒性液的体积比为8:10:1:1。

6.根据权利要求1所述的一种评价污泥重金属微生物毒性的方法，其特征在于，所述步骤(4)的培养条件为：混合液中葡萄糖浓度为7mmol/L，温度为30℃，摇床转速为150r/min，培养时间为30min。培养前后，分别测定葡萄糖浓度。

7.根据权利要求4所述的一种评价污泥重金属微生物毒性的方法，其特征在于，大肠杆菌悬液制备方法如下：

1)对大肠杆菌进行传代培养，传代培养时每次培养到稳定期前期收集菌体，进行下一次传代培养，通过3～7次传代培养获得活性稳定的大肠杆菌，将其培养至稳定期后期收集并离心；

2)将离心过后的大肠杆菌用适量生理盐水清洗，然后用生理盐水重悬制备成大肠杆菌悬液。

8.根据权利要求8所述的一种评价污泥重金属微生物毒性的方法，其特征在于，所述传代培养的条件为：每次按照10％接种量(v/v)将大肠杆菌培养基接种于新鲜培养基进行培养，培养温度为30℃，摇床转速为150r/min。

9.根据权利要求9所述的一种评价污泥重金属微生物毒性的方法，其特征在于，所述大肠杆菌悬液中成菌密度为2×10⁸个/mL。