[发明专利]一种CD19核酸适配体及其应用

说明书

本发明提供一种CD19核酸适配体，该核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，或为SEQ ID No.1所示序列经缺失或延长后的序列。本发明提供的核酸适配体能够以较高的亲和力和特异性结合CD19蛋白，并且能够识别CD19阳性的淋巴瘤细胞，同时与其他蛋白和阴性细胞的交叉结合较弱，有望成为CD19阳性淋巴瘤靶向治疗的新的配体分子。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种新型核酸适配体，具体涉及一种特异性识别靶标分子CD19，并且能够与CD19阳性肿瘤细胞结合的CD19核酸适配体。

背景技术

淋巴瘤(Lymphoma)是一种发病率逐年上升的起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤，可分为霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma，HL)和非霍奇金淋巴瘤(Non Hodgkin’slymphoma，NHL)。其中，非霍奇金淋巴瘤是一种具有很强异质性的独立疾病的总称，其病变主要发生于淋巴结、胸腺、脾脏等淋巴器官，也可发生于淋巴结之外的淋巴组织和器官。与同属于淋巴瘤的霍奇金淋巴瘤相比，非霍奇金淋巴瘤的发病率要显著高于霍奇金淋巴瘤，其不断上升的发病率以及其对全身多器官严重的损害使它成为了人类健康和生存质量的一大杀手。目前，化疗是治疗非霍奇金淋巴瘤的主要方法之一。然而，由于传统的化疗药不能区分正常细胞与肿瘤细胞，杀灭肿瘤细胞的同时也会杀伤正常组织细胞，给患者带来严重的毒副作用。因此急需新的治疗方法来解决这一难题。靶向治疗，通过将药物靶向递送到肿瘤细胞，杀伤肿瘤细胞的同时减少了对机体正常细胞的损伤，成为一种新型抗肿瘤策略。

近年来，淋巴瘤的靶向治疗越来越受到关注，因为相比于传统的放疗与化疗，靶向治疗在发挥药物疗效的同时还可减轻药物对正常组织和细胞的损伤。实现肿瘤靶向治疗，需要有在肿瘤细胞表面高表达的靶标，CD19高表达于B细胞来源的恶性肿瘤细胞上，如急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤等，而在粒细胞、单核细胞、浆细胞、T细胞以及其他正常组织和细胞中不表达，因此，CD19有望成为一个良好的抗肿瘤靶点。肿瘤靶向治疗还需要能特异性识别肿瘤靶标的配体，核酸适配体(Aptamer)即为其中一种。核酸适配体在结构上是一种短的单链DNA或RNA分子，其本身能够形成含有茎环、凸起、发夹、假结或G-四联体等的复杂空间结构，从而与各种靶标特异性结合，它的靶标可以是蛋白质、多肽、核酸、氨基酸、细胞，甚至是一些金属离子等。此外，核酸适配体具有能够体外大量合成、价格便宜、稳定性好、便于储存等优点，有望为新的靶向治疗方法提供更好的策略。目前，以CD19为靶标的核酸适配体还没有报道。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种新的核酸适配体，该核酸适配体能够以较高的亲和力和特异性结合CD19蛋白，并且能够识别CD19阳性的淋巴瘤细胞，同时与其他蛋白和阴性细胞的交叉结合较弱。

本发明的另一目的在于提供上述核酸适配体的应用。

为了实现上述目的，本发明提供一种CD19核酸适配体，包含如SEQ ID No.1所示核苷酸序列

(5’-TGCGTGTGTAGTGTGTCTGTTCTCCTTTTTTTGGTTGCTGCTCTTAGGGATTTGGGCGG-3’)，或SEQ ID No.1所示核苷酸序列经缺失或延长后的序列。

其中，所述缺失后的序列为SEQ ID No.1所示核苷酸序列在5’端截去8个碱基，具体序列如SEQ ID No.2所示：

5’-TAGTGTGTCTGTTCTCCTTTTTTTGGTTGCTGCTCTTAGGGATTTGGGCGG-3’。

其中，所述延长后的序列为SEQ ID No.1所示核苷酸序列在3’端增加一段20个碱基的polyA，具体序列如SEQ ID No.3所示：

5’-TGCGTGTGTAGTGTGTCTGTTCTCCTTTTTTTGGTTGCTGCTCTTAGGGATTTGGGCGGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-3’。