[发明专利]用于检测BRAF突变的引物对和探针的组合产品、组合物、试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201810424882.2 | 申请日： | 2018-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN108374009A | 公开（公告）日： | 2018-08-07 |
| 发明（设计）人： | 段小红;承康平;杨春燕;丁蕊;王东亮;周启明 | 申请（专利权）人： | 求臻医学科技（北京）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 吕露 |
| 地址： | 102199 北京市北京经济*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物 突变 检测 组合产品 试剂盒 锁核酸 探针 应用 分子生物学领域 临床诊断和治疗 荧光探针序列 正向引物序列 发明试剂 探针组合 特异性强 荧光探针 假阳性 癌症 | ||
1.一种引物对和探针的组合产品，包括检测BRAF基因V600E突变的LNA荧光探针以及引物；
所述LNA荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；
所述引物包括检测BRAF突变型的正向引物SEQ ID NO：4和反向引物SEQ ID NO：2；
可选的，所述引物还包括检测BRAF野生型的正向引物SEQ ID NO：3和反向引物SEQ IDNO：2；
其中，所述引物SEQ ID NO：4和3的序列中至少存在一个锁核酸；
和/或；
所述LNA荧光探针序列中至少存在一个锁核酸。
2.根据权利要求1所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，SEQ ID NO：3以及SEQID NO：4的3'端第一个核苷酸为锁核酸。
3.根据权利要求1所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述LNA荧光探针5'端的第13、20位核苷酸为锁核酸。
4.根据权利要求1所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述LNA荧光探针的5′端标记荧光发射基团，3′端标记淬灭基团。
5.根据权利要求4所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述荧光发射基团选自FAM、HEX、VIC或JOE中的任一种，优选为FAM。
6.根据权利要求4所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述淬灭基团选自TAMRA、BHQ或MGB中的任一种，优选为BHQ，更优选为BHQ1。
7.一种组合物，其含有权利要求1-6任一项所述的引物对和探针的组合产品。
8.一种试剂盒，其包含权利要求1-6任一项所述的引物对和探针的组合产品。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括荧光定量PCR反应缓冲液、样品处理液、无核酸水、DNA聚合酶、包含BRAF基因V600E的突变型对照序列以及野生型对照序列中的一种或多种。
10.权利要求1-6任一项所述的引物对和探针的组合产品、权利要求7所述的组合物或权利要求8或9所述的试剂盒在制备用于诊断BRAF突变癌症的试剂或试剂盒中的应用。
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