[发明专利]细胞密度控制仪及其方法、应用有效
申请号: | 201810424968.5 | 申请日: | 2018-05-07 |
公开(公告)号: | CN108624497B | 公开(公告)日: | 2021-08-24 |
发明(设计)人: | 崔永萍;杨洁;阎婷;杨玲珍;付小红;孔鹏舟;杨健;钱钰;马燕春;张玲;王芳;李泓漪;成晓龙 | 申请(专利权)人: | 山西医科大学 |
主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12M1/36 |
代理公司: | 北京恒创益佳知识产权代理事务所(普通合伙) 11556 | 代理人: | 付金豹 |
地址: | 030001 *** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 密度 控制 及其 方法 应用 | ||
1.一种细胞密度控制仪,其特征在于,包括激光光源和沿着激光光路依次设置的准直透镜、筛网及细胞培养平台,细胞培养平台上设置温度控制装置,能够感应细胞培养平台的温度,当温度达到设定温度后关闭激光光源;细胞培养平台设置有容纳传统细胞培养板或培养皿的凹槽及固定装置,激光光源投射到准直透镜后,准直透镜将激光平行出射,平行激光经过筛网后,将激光遮挡为间隔相同的大量的平行光带投射在培养板上;筛网包括多个缝隙间隔条,筛网呈百叶窗形,通过改变缝隙间隔条的倾斜角度,可调节缝隙宽度达到调节筛网透光率的目的。
2.根据权利要求1所述的细胞密度控制仪,其特征在于,还设置有控制缝隙间隔条绕自身轴线旋转的第一转动装置和控制筛网绕垂直于筛网的轴线旋转的第二转动装置。
3.根据权利要求1所述的细胞密度控制仪,其特征在于,所述的缝隙间隔条为避光耐热材质,缝隙间隔条在第一转动装置的驱动下绕自身轴线旋转。
4.根据权利要求1所述的细胞密度控制仪,其特征在于,激光光源选用超短脉冲激光,波长为1064nm,功率为100mW。
5.根据权利要求1所述的细胞密度控制仪,其特征在于,筛网含有数千根长方形缝隙间隔条,缝隙间隔条间隔距离为100微米,构成百叶窗结构。
6.一种利用权利要求1-5任一所述的细胞密度控制仪进行细胞密度控制的方法,其特征在于,接种细胞,待细胞贴壁生长达到最佳生长密度80-90%,吸去细胞培养液,迅速放置于培养板平台上进行固定,通过激光照射,瞬间达到致死温度,终止照射,使接受激光投射部位的细胞死亡裂解,通过两次激光照射,存活的细胞即呈现为均匀分布的散在点状细胞集团。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,打开激光光源后,根据需要的培养密度调整缝隙间隔条的角度获得需要的缝隙宽度,培养板上的细胞经第一次激光照射达到设定温度后温度控制装置切断激光光源的电路,受到照射的带状条纹范围内的细胞死亡,未受到照射的带状范围内的细胞存活,这样培养板上形成死细胞条带与活细胞条带,且死细胞条带与活细胞条带平行间隔分布,然后沿垂直轴转动筛网90°,打开激光光源,对培养板进行第二次照射,达到设定温度后温度控制装置切断激光光源的电路,再次形成与上述死细胞条带与活细胞条带垂直的死细胞条带与活细胞条带,这样最终存活的细胞即呈现为均匀分布的散在点状细胞集团。
8.权利要求6或7所述的细胞密度控制方法的应用,其特征在于,应用于细胞增殖实验、质粒转染实验中。
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