[发明专利]一种高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶及其制备方法

权利要求书

1.一种高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于：由分离胶和浓缩胶组合而成；

所述分离胶中包含的组分有丙烯酰胺、双甲叉丙烯酰胺、甘氨酸、pH稳定剂HEPES、十二烷基硫酸钠、牛磺酸、超纯水、Tris-HCl溶液、过硫酸铵溶液和四甲基乙二胺；

所述浓缩胶中所包含的组分有丙烯酰胺、双甲叉丙烯酰胺、甘氨酸、pH稳定剂HEPES、十二烷基硫酸钠、牛磺酸、超纯水、Tris-HCl溶液、过硫酸铵溶液和四甲基乙二胺。

2.根据权利要求1所述的高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于：所述分离胶中，丙烯酰胺的质量为80-120g，双甲叉丙烯酰胺的质量为2.4-3.6g，甘氨酸的质量为25g，pH稳定剂HEPES的质量为5g，十二烷基硫酸钠的质量为0.5g，牛磺酸的质量为10g，超纯水的的体积为600mL，Tris-HCl溶液的体积为100mL，过硫酸铵溶液的体积为10mL，四甲基乙二胺0.5mL。

3.根据权利要求1所述的高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于：所述浓缩胶中，丙烯酰胺的质量为50g，双甲叉丙烯酰胺的质量为1.5g，甘氨酸的质量为25g，pH稳定剂HEPES的质量为5g，十二烷基硫酸钠的质量为0.5g，牛磺酸的质量为10g，超纯水的的体积为600mL，Tris-HCl溶液的体积为100mL，过硫酸铵溶液的体积为10mL，四甲基乙二胺0.5mL。

4.根据权利要求2或3所述的高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于：所述分离胶和所述浓缩胶中的Tris-HCl溶液均为1M pH6.5的Tris-HCl溶液。

5.根据权利要求2或3所述的高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于：所述分离胶和所述浓缩胶中的过硫酸铵溶液均为10%的过硫酸铵溶液。

6.一种高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1）称取一定量的丙烯酰胺、双甲叉丙烯酰胺、甘氨酸、pH稳定剂HEPES、十二烷基硫酸钠、牛磺酸，置于1000ml烧杯中；

步骤2）向上一步骤的烧杯中加入一定量的超纯水，充分搅拌混匀，形成混合溶液；

步骤3）在上一步骤得到混合溶液中，加入一定量的Tris-HCl溶液、过硫酸铵溶液和四甲基乙二胺，充分搅拌混匀，配置成分离胶溶液；

步骤4）将上一步骤得到分离胶溶液加入到1.0mm的垂直制胶玻璃板中，加入适量的超纯水进行压线，静置一定时间待其凝固，形成分离胶；

步骤5）再次称取一定量的丙烯酰胺、双甲叉丙烯酰胺、甘氨酸、pH稳定剂HEPES、十二烷基硫酸钠、牛磺酸，置于另一个1000ml烧杯中；

步骤6）向上一步骤的烧杯中加入一定量的超纯水，充分搅拌混匀，形成混合溶液；

步骤7）在上一步骤得到混合溶液中，加入一定量的Tris-HCl溶液、过硫酸铵溶液和四甲基乙二胺，充分搅拌混匀，配置成浓缩胶溶液；

步骤8）去除分离胶上方压线的超纯水，并用吸水纸吸干残留的液体，加入上一步骤刚配好的浓缩胶溶液，然后插入梳子，静置一定时间等待凝胶，制成聚丙烯酰胺凝胶。

7.根据权利要求6所述的高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶的制备方法，其特征在于：步骤1）中，称取80-120g丙烯酰胺，2.4-3.6g双甲叉丙烯酰胺，25g甘氨酸，5gpH稳定剂HEPES，0.5g十二烷基硫酸钠，10g牛磺酸。

8.根据权利要求6所述的高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶的制备方法，其特征在于：步骤2）和步骤6）中，均加入600mL的超纯水。

9.根据权利要求6所述的高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶的制备方法，其特征在于：步骤3）和步骤7）中，均加入的100ml的1M pH6.5 Tris-HCl溶液、10ml 10%的过硫酸铵溶液和1ml的四甲基乙二胺。

10.根据权利要求6所述的高效稳定的聚丙烯酰胺凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤4）和步骤8）中，凝胶静置时间均为20-30分钟。