[发明专利]一种突变体斑马鱼在制备变异型免疫缺陷病的动物模型中的应用

说明书

本发明公开了一种突变体斑马鱼在制备变异型免疫缺陷病的动物模型中的应用。该突变体斑马鱼为runx1^W84X/W84X突变体斑马鱼。本发明中首次发现了斑马鱼上runx1突变与B淋巴细胞发育有关，该斑马鱼runx1^W84X/W84X突变体具有与人类似的变异型免疫缺陷病(CVID)疾病的症状，并证明该runx1^W84X/W84X突变体斑马鱼B淋巴细胞免疫应答功能缺陷。另外，本发明首次建立了B淋巴细胞发育障碍，IgM和IgZ重排缺陷，而T细胞发育不受影响或影响很小的人类CVID疾病模型，该斑马鱼模型可成为研究CVID疾病及药物筛选的新载体。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种突变体斑马鱼在制备变异型免疫缺陷病的动物模型中的应用。

背景技术

RUNX蛋白家族是一类具有高度保守蛋白序列的转录因子家族，包括DNA结合结构域和蛋白互作结构域。RUNX家族成员在动物进化中出现很早，并保持着广泛的结构相似性。Runx相关转录因子1(Runt-related transcription factor l，Runxl，也称AML1/CBFA2)，是runx家族中重要成员之一。在个体发育过程中，runx1在与HSCs起始相关的组织和器官中都有表达，是造血细胞基因表达的主要调控因子之一，也是人类白血病中多种染色体易位的常见靶位点，对造血细胞的增殖和分化起到至关重要的作用。作为转录激活因子，runx1独自或协同其他转录因子、直接或间接地调节大量造血相关基因的表达。在runx1条件性敲除小鼠中，小鼠的B淋巴造血细胞发育被阻断，导致IgM(immunoglobulin M)阳性的B淋巴数量减少，B淋巴细胞的VDJ重排缺陷，其通过靶因子Ebf1调控B淋巴细胞发育；另一小鼠模型中，runx1基因缺失导致造血干细胞发育到T淋巴细胞和B淋巴细胞过程受阻，同时抑制了巨核细胞成熟；在人类临床病例中，runx1作为造血发育调控重要基因，表达发生异常如点突变后丧失基因功能导致造血发育缺陷，同时可通过基因重排和和易位，导致骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)，骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferativeneoplasm,MPN)，急性髓系白血病(acute myeloid leukaemia，AML)等免疫功能障碍白血病(Imai,Y.,Kurokawa,M.,Izutsu,K.,Hangaishi,A.,Takeuchi,K.,Maki,K.,Ogawa,S.,Chiba,S.,Mitani,K.,and Hirai,H.(2000).Mutations of the AML1 gene inmyelodysplastic syndrome and their functional implications inleukemogenesis.BLOOD 96,3154-3160.Ichikawa M,Asai T,Saito T,et al.AML-1isrequired for megakaryocytic maturation and lymphocytic differentiation,butnot for maintenance of hematopoietic stem cells in adult hematopoiesis[J].Nature Medicine,2004,10(3):299-304.)。因此，runx1基因在维持造血细胞正常发育中起到不可替代的重要作用，但在关于runx1基因对B淋巴细胞发育成熟的许多机制仍不清楚，需要进一步深入研究。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种突变体斑马鱼在制备变异型免疫缺陷病的动物模型中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种突变体斑马鱼在制备变异型免疫缺陷病(CVID)的动物模型中的应用，其中，所述突变体斑马鱼为runx1^W84X/W84X突变体斑马鱼。

所述的变异型免疫缺陷病(CVID)是由RUNX1基因异常表达引起，即由runx1^W84X/W84X突变引起。