[发明专利]一种采用高效液相色谱法测定黄芪甲苷含量的方法

权利要求书

1.一种采用高效液相色谱法测定黄芪甲苷含量的方法，其特征在于，包括对含有黄芪甲苷的待测样品进行如下预处理：

取含有黄芪甲苷的待测样品，干燥后粉碎，加入由甲醇、65～75％乙醇和氨水以体积比8～10：0.1～0.5：0.5～1.5组成的提取溶剂，充分提取后过滤，取滤液，蒸干后溶解。

2.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述提取溶剂由甲醇、70％乙醇和氨水以体积比9：0.1：1.2组成。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述过滤后，用甲醇和65～75％乙醇以体积比8～10：0.1～0.5组成的混合溶剂洗涤滤渣，将所得洗涤液与所述滤液混合，蒸干。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述过滤后，用甲醇和70％乙醇以体积比9：0.1组成的混合溶剂洗涤滤渣，将所得洗涤液与所述滤液混合，蒸干。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的方法，其特征在于，所述待测样品为黄芪药材、黄芪提取物或含有黄芪的中成药。

6.根据权利要求1～5任意一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)取黄芪甲苷标准品，以甲醇为溶剂，按照浓度梯度配制多份标准品溶液；

(2)将所述多份标准品溶液分别上样于高效液相色谱，采用C18色谱柱、含有38～42％乙腈且余量为水的流动相进行洗脱，得各份标准品溶液对应的色谱图；

(3)以各份标准品溶液的浓度为横坐标、以对应色谱图中黄芪甲苷色谱峰的峰面积为纵坐标作图，得线性回归方程；

(4)以所述预处理所得的产物为待测样品溶液，上样于高效液相色谱，采用与步骤(2)相同的方法进行检测，得到待测样品的色谱图，将其中黄芪甲苷色谱峰的峰面积带入步骤(3)所述线性回归方程中，求得待测样品中黄芪甲苷的含量。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述多份标准品溶液的浓度分别为100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、500μg/mL以及800μg/mL。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述预处理步骤中待测样品的取样量为1～5g；所述待测样品溶液以甲醇为溶剂，体积为8～12ml。

9.根据权利要求6～8任意一项所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为1～1.5ml/min，标准品溶液或待测样品溶液的进样量为8～12μL。

10.根据权利要求6～9任意一项所述的方法，其特征在于，所述方法采用蒸发光散射检测器对经高效液相色谱分离后的样品进行检测；

优选地，所述蒸发光散射检测器采用的蒸发温度为95～105℃，雾化温度为75～85℃，氮气流量为：2～2.5Gas。