[发明专利]构建兔膝软骨下骨损伤动物模型的方法和用于评价成骨材料的方法

说明书

本发明公开了构建兔膝软骨下骨损伤动物模型的方法和用于评价成骨材料的方法，其中，构建兔膝软骨下骨损伤动物模型的方法，包括：(1)对试验用新西兰兔进行全身麻醉处理并仰卧固定；(2)对所述新西兰兔的一侧膝关节处进行备皮处理；(3)以膝关节为中心进行纵向切口，并沿髌骨内侧与股四头肌间隙切开，外翻髌骨以显露出关节腔和胫骨平台关节面；(4)利用角膜环钻由所述胫骨平台关节面正中纵向制一圆柱形孔洞，以便获得兔膝软骨下骨损伤动物模型。利用该兔膝软骨下骨损伤动物模型可以有效地对成骨药物或者成骨材料进行评价，进而为成骨药物或者成骨材料的筛选和评价提供可靠依据。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体而言，本发明涉及构建兔膝软骨下骨损伤动物模型的方法和用于评价成骨材料的方法。

背景技术

膝骨关节炎(KOA)动物模型多种多样，包括动物来源，以及制作方法，动物模型的可复制性，对于OA疾病机制的阐明至关重要，也更有助于将实验结果尽快的应用于临床。常用的OA模型中，除了动物选择的不同(小鼠、大鼠、荷兰猪、兔、狗、山羊、马等)，制备方法也是各有特色，主要方法有：1、自发形成，常用动物包括：鼠类、狗、马，例如：C57/BI6、Balb/c小鼠、跑台训练的大鼠、荷兰猪等，评价：临床相关，但是疾病形态与发病率相距较大。2、化学诱导，常用动物包括：鼠类、兔、狗、马，方法：木瓜蛋白酶、胶原酶、血清、细胞因子等，评价：很难应用于人类，易致软骨细胞凋亡以及局部炎症反应。3、手术诱导，常用动物包括：鼠类、兔、羊、狗、马等，方法：前交叉韧带切断、内侧副韧带切断、内侧半月板摘除，以及上述方法联合损伤。缺点：疾病进展缓慢，中度的软骨损伤，与临床高度相关，不伴有关节失稳，需进行创伤造模。然而现存的涉及膝软骨下骨损伤与KOA的动物模型，仅仅阐明二者之间的关系：软骨下骨损伤与KOA的关系密切，可以导致KOA的发生。但所有有关软骨下骨损伤的模型均未涉及到治疗，更别说诱导局部再生。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出了构建兔膝软骨下骨损伤动物模型的方法和用于评价成骨材料的方法，利用该兔膝软骨下骨损伤动物模型可以有效地对成骨药物或者成骨材料进行评价，进而为成骨药物或者成骨材料的筛选和评价提供可靠依据。

根据本发明的一个方面，本发明提出了一种构建兔膝软骨下骨损伤动物模型的方法，根据本发明的实施例，该方法包括：

(1)对试验用新西兰兔进行全身麻醉处理并仰卧固定；

(2)对所述新西兰兔的一侧膝关节处进行备皮处理；

(3)以膝关节为中心进行纵向切口，并沿髌骨内侧与股四头肌间隙切开，外翻髌骨以显露出关节腔和胫骨平台关节面；

(4)利用角膜环钻由所述胫骨平台关节面正中纵向制一圆柱形孔洞，以便获得兔膝软骨下骨损伤动物模型。

另外，根据本发明上述实施例的构建兔膝软骨下骨损伤动物模型的方法还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的一些实施例，所述全身麻醉处理包括：对新西兰兔按照1.0ml/kg的计量进行耳缘静脉注射4％戊巴比妥钠。

根据本发明的一些实施例，所述切口的长度为4cm。

根据本发明的一些实施例，所述圆柱形孔洞的直径为4mm，深度为8mm。

根据本发明的一些实施例，上述实施例的构建兔膝软骨下骨损伤动物模型的方法中，步骤(4)进一步包括：

(4-1)将所述角膜环钻由所述胫骨平台关节面正中纵向旋入2mm，并将所述角膜环钻连同其内的软骨/骨组织一同取出；

(4-2)利用低速钻连接直径4mm钻头向内进一步深入不超过8mm取出，再将所述角膜环钻旋入将其内的骨栓取出。