[发明专利]一种通过高效液相色谱测定特女贞苷含量的方法

权利要求书

1.一种通过高效液相色谱测定特女贞苷含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)采用体积分数为55～65％的甲醇的水溶液从含有特女贞苷的待测样品中提取特女贞苷，得待测液；

2)将所述待测液通入高效液相色谱仪，采用反相C18色谱柱，以体积比为32～37:63～68的甲醇与水为流动相进行洗脱。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品为女贞子药材粉末。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述女贞子药材粉末的直径小于50目。

4.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中采用体积分数为60％的甲醇的水溶液提取特女贞苷。

5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述待测样品与甲醇的水溶液的质量体积比1:20～25。

6.根据权利要求1～5任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤1)具体为：

将待测样品与甲醇的水溶液混合，在功率400～600W的超声条件下处理25～35min，然后涡旋混匀，离心，取上清液，重复上述操作至少一次，并将多次得到的上清液混合后过0.45μm的滤膜，即得所述待测液。

7.根据权利要求1或6所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中控制流速为0.8～1.2mL·min^-1，优选为1.0mL·min^-1；

和/或，柱温为33～37℃，优选为35℃。

8.根据权利要求1～7任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中检测器为UV-DAD检测器，检测波长为224nm；

和/或，进样量为20μL。

9.根据权利要求1～8任一项所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)取特女贞苷标准品，以甲醇为溶剂，按照浓度梯度配制多份标准品溶液；

2)将所述多份标准品溶液分别上样于高效液相色谱，采用C18色谱柱，以体积比为35:65的甲醇与水为流动相进行洗脱，得各份标准品溶液对应的色谱图；

3)以各份标准品溶液的浓度为横坐标、以对应色谱图中特女贞苷色谱峰的峰面积为纵坐标作图，得线性回归方程；

4)待测样品与体积分数为55～65％的甲醇的水溶液按质量体积比1:20～25混合，在功率400～600W的超声条件下处理25～35min，然后涡旋混匀，离心，取上清液，重复上述操作至少一次，并将多次得到的上清液混合后过0.45μm的滤膜，即得待测液，上样于高效液相色谱柱中，采用与步骤2)相同的方法进行检测，得到待测样品的色谱图，将其中特女贞苷色谱峰的峰面积带入步骤3)所述线性回归方程中，求得待测样品中特女贞苷的含量。