[发明专利]一种检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法

权利要求书

1.一种检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)依次制备对照品储备溶液、中间对照品储备溶液、对照品溶液；

(2)制备空白棉签提取溶液；

(3)擦拭骨化三醇生产装置，制备待测骨化三醇样品溶液；

(4)通过HPLC法测得空白棉签提取溶液的HPLC谱图，采集骨化三醇对照品的特征峰，对待测骨化三醇样品溶液进行检测；

(5)确定每100平方厘米板取样点上骨化三醇软胶囊清洁残留量；

其中所述HPLC法中流动相为50体积份乙腈、40体积份0.1％三乙胺水溶液与10体积份甲醇的混合溶液。

2.根据权利要求1所述的检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，所述HPLC法的条件进一步包括：HPLC色谱柱：C18，3.5微米，3×100毫米或等效柱；流速：0.7毫升/分钟；进样量：1000微升；柱温：35摄氏度；检测波长：265纳米。

3.根据权利要求1所述的检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，骨化三醇对照品储备溶液是按照下列步骤制备的：(i)称取2.5mg骨化三醇对照品置于250mL容量瓶中，(ii)加入甲醇水溶液振摇使其溶解，使用甲醇水溶液定容至250mL；中间对照品储备溶液是按照下列步骤制备的：(iii)取1.0mL对照储备溶液于250mL容量瓶中，(iv)使用甲醇水溶液定容至250mL；骨化三醇对照品溶液是按照下列步骤制备的：(v)取2.0mL骨化三醇中间对照品储备溶液于50mL容量瓶中，(vi)使用甲醇水溶液定容至50mL。

4.根据权利要求1所述的检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，空白棉签提取溶液是按照下列步骤制备的：将2支空白棉签放入玻璃小瓶中，加入1.5mL甲醇水溶液，将玻璃小瓶密封并依次进行超声、涡旋处理，得到空白棉签提取溶液。

5.根据权利要求1所述的检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，待测骨化三醇样品溶液是按照下列步骤制备的：在骨化三醇生产装置中随机选择取样点，每个取样点的面积为100平方厘米，其中每个取样点配一玻璃小瓶并分别贴好相应标签加以区分，在玻璃小瓶中放入2支空白棉签并加入1.5mL甲醇水溶液，用2支空白棉签在各取样点按从左到右或从上到下方向擦拭，擦拭完将棉签放入相应的玻璃小瓶中，将玻璃小瓶密封依次进行超声、涡旋处理，得到待测骨化三醇样品溶液。

6.根据权利要求4或5所述的检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，所述进行超声、涡旋处理是指超声处理15min、涡旋处理10-15秒。

7.根据权利要求1所述的检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，所述待测骨化三醇为生产骨化三醇软胶囊过程中残留在生产装置中的骨化三醇活性药物成分。

8.根据权利要求3-5任一项所述的检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，所述甲醇水溶液的浓度为40v％。

9.根据权利要求1所述的检测骨化三醇软胶囊清洁残留量的方法，其特征在于，所述步骤(5)中，基于下式确定每100平方厘米板取样点上所述待测骨化三醇的量：

其中，所述对照品为已知纯度的骨化三醇。