[发明专利]一种分离利伐沙班和其光学异构体的高效液相色谱方法

说明书

本发明公开了一种分离利伐沙班和其光学异构体的高效液相色谱方法，参数包括：色谱柱：Agilent ZORBAX SB‑C18液相色谱柱(250×4.6mm，5μm)；流动相A相：水，含有5μM浓度的(S)‑1‑BOC‑3‑羟基哌啶；流动相B相：体积百分浓度为60％的乙腈水溶液，含有5μM浓度的(S)‑1‑BOC‑3‑羟基哌啶；洗脱程序：0‑5min，20％B；5‑15min，20％→60％B；15‑40min，60％→100％B；流速：0.9‑1.1mL/min；柱温：34‑36℃；检测波长：248‑252nm。本发明提供的高效液相色谱方法基于常规的C18液相色谱柱即可有效分离利伐沙班和其光学异构体，避免使用手性填料色谱柱，对于很多中小型企业或研发机构非常经济。

技术领域

本发明属于医药分析领域，涉及一种分离利伐沙班和其光学异构体的高效液相色谱方法。

背景技术

利伐沙班(rivaroxaban)，化学名5-氯-N-(((5S)-2-氧代-3-(4-(3-氧代吗啉-4-基)苯基)-1，3-恶唑啉-5-基)甲基)噻吩-2-甲酰胺，由德国拜耳医药和美国强生公司联合研发成功。2008年10月，在加拿大和欧盟获得批准上市，商品名为Xarelto。利伐沙班是全球第一个口服的直接Xa因子抑制剂，可高选择性、竞争性抑制游离和结合的Xa因子以及凝血酶原活性，以剂量-依赖方式延长活化部分凝血活酶时间板和凝血酶原时间，从而延长凝血时间，减少凝血酶形成，具有生物利用度高，治疗疾病谱广，量效关系稳定，口服方便，出血风险低的特点。

利伐沙班存在一个手性中心，目前合成利伐沙班的工艺都不可避免地在终产物中含有利伐沙班光学异构体。利伐沙班和其光学异构体化学结构式如下：

为了控制利伐沙班中光学异构体的含量，有必要开发分析利伐沙班和其光学异构体的高效液相色谱方法。由于利伐沙班和其光学异构体的极性极其相似，二者在常规的C18色谱柱上极难分开。所以，目前基本都是通过基于手性色谱柱的高效液相色谱分离二者。

然而，手性色谱柱价格昂贵，对很多中小型企业或研发机构是一笔不小的开销，能使用常规C18色谱柱实现分离的化合物绝不会去使用手性填料色谱柱。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种分离利伐沙班和其光学异构体的高效液相色谱方法，以在常规的C18色谱柱上将二者有效分离。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

一种分离利伐沙班和其光学异构体的高效液相色谱方法，参数包括：

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18液相色谱柱(250×4.6mm，5μm)；

流动相A相：水，含5μM浓度的(S)-1-BOC-3-羟基哌啶；

流动相B相：体积百分浓度为60％的乙腈水溶液，含5μM浓度的(S)-1-BOC-3-羟基哌啶；

洗脱程序：0-5min，20％B；5-15min，20％→60％B；15-40min，60％→100％B；

流速：0.9-1.1mL/min；

柱温：34-36℃；

检测波长：248-252nm。

优选地，流速1.0mL/min。

优选地，柱温35℃。

优选地，检测波长250nm。

有益效果：

本发明提供的高效液相色谱方法基于常规的C18液相色谱柱即可有效分离利伐沙班和其光学异构体，避免使用手性填料色谱柱，对于很多中小型企业或研发机构非常经济。