[发明专利]一种有机磷农药残留量的比色检测方法

说明书

本发明公开了一种有机磷农药残留量的比色检测方法，属于农药残留的检测方法技术领域。按照下述步骤进行：步骤一：金纳米粒子的制备；步骤二：金纳米粒子用于有机磷农药标准品的比色检测；步骤三：果蔬样品有机磷农药残留量的检测。本发明提供一种利用金纳米粒子结合比色法实现快速检测果蔬中有机磷农药残留的方法，可以实现有机磷农药残留的快速定量检测，这能够为农业生产提供指导。

技术领域

本发明属于农药残留的检测方法技术领域，尤其涉及一种将金纳米粒子模拟酶用于农药残留的检测方法。

背景技术

有机磷农药品种多、药效高，用途广，易分解，主要用于防治果蔬病、虫、害。有机磷农药进入人体后可抑制血液和组织中的乙酞胆碱酷酶的活性，造成神经递质乙酞胆碱大量蓄积，导致神经麻痹。目前，用于有机磷农药残留的检测方法包括色谱法、色谱-质谱联用法、超临界流体色谱法、毛细管电泳技术、酶联免疫吸附测定法等。这些方法具有检测准确度高，检出限低的优势，但是检测过程中样品前处理复杂，检测设备昂贵，难以用于现场和大样本量的检测。因此，现在急需开发操作方便的传感器来检测样品中可能存在的有机磷农药残留。

金属纳米粒子由于具有金属离子催化活性位点，近年来已有不少学者发现金属纳米粒子具有过氧化物模拟酶活性并将其结合比色检测法应用于生化分析。比色检测法的原理是利用过氧化物酶催化或有机过氧化物氧化酶底物所产生的颜色变化而进行对酶活性、或酶底物的潮定，同时通过偶联的方法建立对待测指标进行测定的方法。该方法不需要大型精密仪器设备，只需裸眼即可观察实验结果并且具有测定灵敏度高的特点，适合用于大量样本的在线检测。

发明内容

本发明的目的在于研究一种利用金纳米粒子的聚集和抑制的比色方法用于果蔬农药残留的检测，本发明样品前处理简单，检测速度快，缩短了检测周期，成本低，实现了果蔬有机磷农药的快速检测。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的。

本发明的一种利用金纳米粒子实现有机磷农药残留的比色检测方法，按照下述步骤进行：

步骤一：金纳米粒子的制备；

步骤二：金纳米粒子用于有机磷农药标准品的比色检测；

步骤三：果蔬样品有机磷农药残留量的检测。

所述步骤一金纳米粒子的制备方法，按照下述步骤进行：

(1)种子液制备：将浓度为0.1～0.5M氯金酸溶液中加入浓度为0.1～0.5M溴化十六烷基三甲铵，充分搅拌溶解后加入浓度为0.01～0.02M硼氢化钠，以400～800转每分钟的速度充分搅拌搅1～5min得到棕黄色溶液，其中氯金酸溶液、溴化十六烷基三甲铵、溴化十六烷基三甲铵的体积比为：2～10：1～5：0.2～0.8(mL/mL/mL)。

(2)生长液制备：将浓度为2～6mM硝酸银溶液加入浓度为0.1～0.5M溴化十六烷基三甲铵，硝酸银溶液与溴化十六烷基三甲铵溶液体积比为10～200(mL/mL)，以100～400转每分钟的速度充分搅拌溶解1～5分钟，再加入浓度为0.1～0.5M氯金酸溶液，硝酸银溶液与氯金酸溶液体积比为2～10(mL/mL)，以400～800转每分钟的速度充分搅拌搅1～5min后，缓慢加入浓度为50～90mM的抗坏血酸溶液，硝酸银溶液与抗坏血酸溶液体积比为10～50(mL/mL)，继续以400～800转每分钟的速度充分搅拌搅1～5min，抗坏血酸作为温和的还原剂将生长液又棕黄色还原至无色，最后加入，过程(1)制得的种子液，生长液与种子液体积比为20～100(mL/mL)。在25～35℃下放置一夜。以30～50℃的温度5000～10000转每分钟的转速离心10分钟，离心两次，取固体分散在超纯水中，超纯水与离心后金纳米粒子溶液体积比为1～100(mL/mL)，得到红色金纳米粒子溶液。