[发明专利]一种具有免疫活性的野葛根多糖制备方法

说明书

本发明涉及一种具有免疫活性的野葛根多糖制备方法。该方法包含以下步骤：将新鲜野葛根洗净切块后加水打浆，热处理，在浆液中加入耐高温淀粉酶及糖化酶进行酶解反应；过滤，滤液进行真空浓缩；在浓缩后的滤液中加入乙醇，分离得到沉淀；沉淀加水复溶，真空冷冻干燥后得到野葛根多糖成品。使用该方法制备的野葛根多糖能有效促进小鼠巨噬细胞分泌细胞因子(NO、TNF‑α和IL‑6)，具有免疫调节活性；且该方法多糖得率达25%。

技术领域

本发明涉及天然活性物质的提取，提供一种具有免疫活性的野葛根多糖制备方法。

背景技术

葛根是豆科葛属多年生落叶藤本植物的块根，药食同源，分为粉葛和野葛。粉葛富含淀粉,是重要的食材及食品添加剂；野葛为中医中常用的祛风解毒药，富含异黄酮类、多糖类、氨基酸及微量元素等物质，素有“南方人参”的美誉。现代科学证明其有广泛的药理和保健功能，其有效成分在维持心血管系统稳定性、保护脑神经、抗氧化、防止肝肾损伤、改善代谢与免疫功能等方面均有一定的药理作用，葛根黄酮具有改善心脑血液循环,扩张冠状动脉,降血压,降血糖等作用;大豆苷元有明显抗心律失常作用,抑制白血细胞的增殖及黑色素瘤细胞的分化，具有可观的临床应用前景。

多糖是构成生命的四大基本物质之一，由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子结构复杂且庞大的糖类物质。分子量从几万到几千万，具有许多生物活性，包括抗感染、抗肿瘤、增强免疫、降血糖、抗病毒等作用。多糖广泛存在于高等植物、动物细胞膜、微生物细胞壁中，不但是生物体的重要组成部分还参与多种生理功能。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有免疫调节活性的野葛根多糖制备方法，并采用小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌的免疫活性因子（TNF-α，NO，IL-6）作为指标，对该多糖的免疫调节活性进行评价。为野葛根功能食品开发提供相关数据。

本发明技术方案如下：

一种具有免疫活性的野葛根多糖制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

（1）将新鲜野葛根除杂，清洗干净，沥干，切碎；

（2）将野葛根碎块加水磨浆，料水比1:30~1:50，热处理，冷却至室温；

（3）在浆液中加入酶进行酶解反应，酶解条件为：先加高温淀粉酶，时间1~2小时，温度50~65℃，pH5~6.5；后加糖化酶，时间1~2小时，温度50~65℃，pH6~7；

（4）将灭酶后的浆液过滤，滤液在40~55℃进行真空浓缩；

（5）浓缩液中加入无水乙醇，体积比1:3~1:5，静置过夜，离心分离得野葛根多糖湿品；

（6）野葛根多糖加水复溶，真空冷冻干燥后得到野葛根多糖成品。

上述方法中，步骤（2）中，所述热处理温度为80~99℃，热处理时间为2~3小时。

上述方法中，步骤（3）中，所述酶解使用的酶为耐高温淀粉酶及糖化酶，用量分别为浆液重量的0.0012%-0.0020%和0.0080%-0.015%。

上述方法中，步骤（3）中淀粉酶酶解时间1.5小时，温度60℃，pH6。

上述方法中，步骤（3）中糖化酶酶解时间1.5小时，温度60℃，pH6.5。

上述方法中，步骤（3）中，所述酶解时加入浆液重量0.2%的氯化钙以增加酶的稳定性及耐热性。

上述方法中，步骤（4）中真空浓缩温度为55℃。