[发明专利]一种利用共养生孢菌属细菌产β-甘露聚糖酶的方法

说明书

一种利用共养生孢菌属细菌产β‑甘露聚糖酶的方法，它涉及涉及一种β‑甘露聚糖酶的生产方法。本发明提供了一种利用共养生孢菌属细菌产β‑甘露聚糖酶的方法，该方法与现有技术相比具有工艺要求低、周期短、生产成本低的优势。产β‑甘露聚糖酶的方法：一、将共养生孢菌属细菌HDYM‑14接种于魔芋粉培养基中；二、发酵培养、离心，取上清液即获得β‑甘露聚糖酶。本发明魔芋粉培养基成分简单，只有魔芋粉、冰乙酸、硝酸铵和氯化钠，均为工业级原料，成本低廉。

技术领域

本发明涉及一种β-甘露聚糖酶的生产方法。

背景技术

β-甘露聚糖酶，英文名β-mannanase，特异性水解β-1,4糖苷键。β-甘露聚糖酶可将多聚糖降解为低聚糖，低聚糖可作为膳食纤维，促进人体肠道中益生菌的生长，进而起到促进食物消化、维持肠道健康、增强免疫等功效。此外，食品加工领域有极其重要的用途，如果汁澄清和植物中天然活性组分提取。此外，由于β-甘露聚糖酶的主要底物是半纤维素，该酶在纤维性麻类作物的生物脱胶中也有广泛应用，在麻纤维生产的沤麻环节中起关键作用。

发明内容

本发明提供了一种利用共养生孢菌属细菌产β-甘露聚糖酶的方法，该方法与现有技术相比具有工艺要求低、周期短、生产成本低的优势。

本发明利用共养生孢菌属细菌产β-甘露聚糖酶的方法按以下步骤进行：

一、将共养生孢菌属细菌HDYM-14接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-14浓度为1.5×10⁶～2.5×10⁶个/mL；

二、在温度为30～37℃的条件下，发酵培养40～60h，然后离心，取上清液即获得β-甘露聚糖酶；

其中，步骤一魔芋粉培养基按1～1.5g魔芋粉、0.3～1mL冰乙酸、0.5g硝酸铵、0.5g氯化钠和100mL自来水的比例制成。

本发明中使用的共养生孢菌属(Syntrophospora sp.)细菌HDYM-14(于“黑龙江省不同地区亚麻沤麻液中功能菌生物多样性的研究”一文中公开，保藏于黑龙江大学生命科学学院省高校微生物重点实验室中)为化能异养型细菌，分离自巴彦县亚麻温水沤麻液。

本发明中共养生孢菌属(Syntrophospora sp.)细菌HDYM-14在魔芋粉、冰乙酸、硝酸铵、氯化钠的底物诱导作用下产生胞外β-甘露聚糖酶。发酵培养过程中魔芋粉被降解为小分子还原糖，可被细菌HDYM-14利用；冰乙酸作为小分子羧酸，是共养生孢菌属(Syntrophospora sp.)细菌易于利用的碳源；硝酸铵和氯化钠中的硫酸根、铵根和钠离子均可被细菌HDYM-14利用。因此，该发酵液不但成分简单，β-甘露聚糖酶易于分离；并且对环境几乎没有污染。

本发明魔芋粉培养基成分简单，只有魔芋粉、冰乙酸、硝酸铵和氯化钠，均为工业级原料，成本低廉；而且魔芋粉培养基用水仅为自来水。

本发明发酵温度范围为30～37℃，温度参数宽泛，易于实现。培养40～60h后上清液中β-甘露聚糖酶活力即可达到2800～3800U/mL，发酵周期短，酶活高。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式利用共养生孢菌属细菌产β-甘露聚糖酶的方法按以下步骤进行：

一、将共养生孢菌属细菌HDYM-14接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-14浓度为1.5×10⁶～2.5×10⁶个/mL；

二、在温度为30～37℃的条件下，发酵培养40～60h，然后离心，取上清液即获得β-甘露聚糖酶；