[发明专利]一种胆酸接枝硒化壳寡糖的制备方法

说明书

本发明涉及一种由胆酸、壳寡糖和亚硒酸钠为原料制备的胆酸接枝硒化壳寡糖及其制备方法。本发明首先以胆酸和固体光气为原料制备胆酸酰氯，再将壳寡糖(聚合度：2～20)与制备的胆酸酰氯反应，制备N‑胆酰壳寡糖，然后再将N‑胆酰壳寡糖与对甲苯磺酰氯反应，使其游离羟基活化，最后将其与亚硒酸钠反应，生成胆酸接枝的硒化壳寡糖。

技术领域

本发明属药品及保健品领域，特别是涉及一种由胆酸、壳寡糖和亚硒酸钠为原料制备的胆酸接枝的硒化壳寡糖及其制备方法。

背景技术

硒是人体生命活动中必需的微量元素之一。人类膳食中天然食物的硒含量普遍较低，且受环境的影响很大。大量研究表明，硒与癌症、心脑血管疾病、艾滋病、糖尿病、克山病、白内障等40多种疾病的发生有关。因此，适当补硒可以有效预防以上疾病。另外硒具有保护细胞膜免受氧化剂损害的作用，可以和有毒重金属结合从而消除其毒性。研究表明，无机硒的毒性大，生物活性低，污染环境；而有机硒的毒性小，吸收率高，生物利用率高，在满足动物生长发育所需的添加量范围内对环境基本没有污染。

虽然现在开发出许多有机硒产品，但普遍存在含硒率低，不具有肝胆靶向性。因此开发制备具有较高富硒率和肝胆靶向性的有机硒化合物具有重要意义。

本发明以胆酸、壳寡糖和亚硒酸钠为主要原料，制备的胆酸接枝的硒化壳寡糖具有较高的硒化率和胆酸接枝率。

发明内容

本发明首先以胆酸和固体光气为原料制备胆酸酰氯，再将壳寡糖(聚合度：2～20)与制备的胆酸酰氯反应，制备N-胆酰壳寡糖，然后再将N-胆酰壳寡糖与对甲苯磺酰氯反应，使其游离羟基活化，最后将其与亚硒酸钠反应，生成胆酸接枝的硒化壳寡糖。

附图说明

本发明的具体内容由以下实施例及实施例3的附图给出。

附图是实施例3中硒溶液浓度-吸光度标准曲线图。

具体实施方式

实施例1

(1)胆酸酰氯的制备

将0.020mol胆酸和100mL氯仿置于250mL三口反应瓶中，搅拌使胆酸溶解，再加入2.00gDMF，搅拌均匀，25℃温度下，将0.005mol三光气溶于20mL氯仿中，然后搅拌下将三光气氯仿溶液缓慢滴入反应瓶中，需1h，然后升温至60℃，搅拌反应3h，减压蒸馏蒸去氯仿，刮出，无水乙醚洗涤3次，真空干燥，得浅灰色固体粉末，备用；

(2)N～胆酸壳寡糖的制备

将16.00g壳寡糖(聚合度：2～20)加入100mL蒸馏水中，搅拌溶解后，降温至0℃，缓慢加入实施例1(1)的产物，0℃温度下搅拌反应8h，加入50mL无水乙醇，逐渐有固体颗粒析出，过滤，氯仿洗涤三次，无水乙醇洗涤三次，真空干燥，得白色固体粉末；

(3)N-胆酸硒化壳寡糖的制备

将上述实施例1(2)的产物溶解于100mLDMF中，降温至0℃，一次性加入0.020mol的TsCl，搅拌溶解，室温下搅拌反应5h，放置12h，过滤，无水乙醇洗涤3次，真空干燥，得浅褐色固体粉末；将上述浅褐色固体粉末溶解于100mL蒸馏水中，加入0.015mol亚硒酸钠，升温至60℃，保温反应3h，蒸馏，浓缩，加入30mL无水乙醇沉淀，过滤，无水乙醇洗涤3次，干燥，得褐色固体粉末。

实施例2

分别称取壳寡糖(聚合度：2～20)和实施例1(2)的N-胆酸壳寡糖产物各0.1000g，以甲基橙作指示剂，加入浓度为0.100mol/L的盐酸标准液V₁/L，用0.100mol/L的氢氧化钠标准液滴定至溶液由红色变成橙黄色为终点，消耗的体积记为V₂/L；其中：