[发明专利]一种BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器的制备方法和用途

权利要求书

1.一种BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备牛血清蛋白--金银合金纳米簇BSA-Au/Ag NCs水溶液，备用；

将4mL的氯金酸溶液和1mL的硝酸银溶液混合，加入到5mL的牛血清蛋白溶液中，强有力搅拌混合5分钟后，用氢氧化钠调节溶液的酸碱度，然后置于37℃的恒温油浴锅反应12小时，反应结束后用超纯水透析纯化48小时，得到牛血清蛋白--金银合金纳米簇水溶液；

氯金酸溶液的浓度为10mM，硝酸银溶液的浓度为10mM，牛血清蛋白溶液的浓度为0.75mM，金银的摩尔比为4:1；

(2)建立BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器：将步骤(1)得到的BSA-Au/Ag NCs水溶液、OPD、HRP加入到稀释液磷酸盐缓冲液中，得到BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器；

其中，所述BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器中，BSA-Au/Ag NCs的浓度为20nM，OPD的浓度为50～300μM；HRP的浓度为10ng/mL。

2.如权利要求1所述的一种BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所用磷酸盐缓冲液浓度为10mM，pH＝6.0。

3.将权利要求1所述制备方法制得的BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器用于检测尿酸的用途。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，利用BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器检测尿酸的方法，包括如下步骤：

(1)尿酸酶催化尿酸生成H₂O₂；

(2)将步骤(1)制得的H₂O₂加入BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器中，反应温度为25～50℃，时间为10～60分钟；检测其荧光强度，580nm处荧光强度为I₅₈₀，690nm处荧光强度为I₆₉₀，得出I₅₈₀/I₆₉₀；

(3)配置一系列不同浓度的尿酸，经尿酸酶催化后，加入BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器中，反应完全后检测产物荧光，根据不同浓度的尿酸对应的荧光信号强度得到一系列的I₅₈₀/I₆₉₀，建立标准曲线。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，步骤(1)中，催化pH为4～8；催化时间为10～60分钟；催化温度为25～50℃；尿酸酶含量为5～200μg/mL。