[发明专利]用于二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定的引物及方法有效
| 申请号： | 201810449623.5 | 申请日： | 2018-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN108517371B | 公开（公告）日： | 2020-06-05 |
| 发明（设计）人： | 卢合均;李鹏程;赵艳艳;王坤波;刘方;周忠丽;蔡小彦;王星星;王玉红;许艳超;侯宇清;张振梅;王春英 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院棉花研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙) 51241 | 代理人： | 李鹏 |
| 地址： | 455000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 二倍体 基因组 四倍体 鉴定 引物 方法 | ||
1.用于二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定的引物du01，引物du01的正向引物序列如SEQ ID No.1所示，引物du01的反向引物序列如SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的引物du01在二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定上的应用。
3.用于二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定的试剂盒，其特征在于，包含有权利要求1所述的引物du01。
4.一种鉴定棉花二倍体D基因组棉种或四倍体棉种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)使用权利要求1所述引物du01，以待测棉种的核基因组全部DNA为模板进行PCR扩增；
(2)PCR扩增产物做电泳检测；如果得到一条750bp的目的产物，则待测棉种为棉花二倍体D基因组棉种和/或四倍体棉种。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：PCR扩增体系为：du01正向引物和反向引物各0.5μL，总DNA 4μL，2×Taq Mix5μL；反应体系为10μL；PCR扩增程序为：95℃预变性5分钟；94℃变性30秒；58℃退火35秒；72℃延伸1分钟；30个循环；72℃保持5分钟，10℃存放。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述Taq Mix由Taq酶、dNTP、Buffer组成，Taq Mix中Taq酶的浓度为2×，dNTP的浓度为1mM，Buffer由1000mM KCl，200mM pH 8.3的Tris-HCl，30mM MgCl2组成。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述电泳为琼脂糖凝胶电泳。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院棉花研究所，未经中国农业科学院棉花研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810449623.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
